人血管生成素样蛋白2检测试剂盒

简介
血管生成素样蛋白(ANGPTLs)是一种与血管生成素(一种血管生成调节因子)相似结构的分泌蛋白,至今为止，共识别有7种血管生成素样蛋白. 已证明血管生成素样蛋白2 (ANGPTL2)与血管细胞和单核细胞活动息息相关,血管生成素样蛋白3(ANGPTL3) 和血管生成素样蛋白4 (ANGPTL4)在体液代谢和血管生成素样生长因子(AGF)扮演着至关重要的角色, 血管生成素样蛋白6(ANGPTL6)则影响着能量代谢.这些血管生成素样蛋白的生物效应意味着解决生命相关的疾病(如代谢综合征,癌症)的新方法.据报道在患有强胰岛素拮抗性糖尿病,糖尿病,动脉硬化等病人的血液中都能观测得到高水平的人血管生成素样蛋白2(ANGPTL2).

此定量ELISA检测试剂盒能用于人血清和血浆中ANGPTL2的定量检测.
实验原理
此试剂盒是一种夹心法的ELISA试剂盒，使用了两种高特异性的抗体。TMB作为显色剂，最终溶液显色强度与样品中ANGPTL2的量成正比
检测范围:
0.05 - 3.5 ng/mL

预期用途
仅供研究，不能用于诊断

• 此试剂盒用于血清，EDTA-血浆和细胞培养上清中人ANGPTL2的定量检测
• 人血清和EDTA-血浆建议用EIA缓冲液10倍稀释

试剂盒组成

• 微孔板：

包被有抗人ANGPTL2 (K2-1A1A)小鼠IgG单抗，亲和纯化 96Tx 1

• 浓缩标记抗体：

（30X），HRP标记抗人ANGPTL2 (K1-12A4A)小鼠IgG 单抗 0.4mlx 1

• 标准品：人ANGPTL2 0.5mL x 2
• EIA缓冲液： 30mL x 1
• 标记抗体稀释液：1%的BSA，含0.05%的吐温20的PBS 12mL x 1
• 显色剂：TMB 底物液 15mL x 1
• 终止液：1N硫酸 12mL x 1
• 洗涤缓冲浓缩液:（40X），0.05%吐温20的磷酸缓冲液 50mL x 1

操作指南
实验所需材料但试剂盒未提供
酶标仪（450nm） 移液器和枪头
量筒和烧杯 去离子水
冰箱（4℃） 坐标纸（对数/对数）
吸水纸 试管（用于标准品稀释）
孵箱（37±1℃） 洗瓶（用于洗板）
一次性微移液管
试剂准备

• 稀释洗涤缓冲液制备：

此洗涤液是一种40倍浓缩液。先将洗涤浓缩液平衡至室温，充分混匀，然后吸取50ml浓缩液与1950ml的去离子水混匀，即得稀释洗涤液。配制的稀释洗涤液应保存于冰箱内，并于2周内用完。

• 稀释标记抗体的制备：

标记抗体是一种30倍浓缩物，用标记抗体稀释液将浓缩标记抗体稀释30倍，即得。
例：如果只测一条板，8孔，则需要标记抗体800ul（30ul的标记抗体+870ul的标记抗体稀释液，混匀，使用时，每孔加100ul）
浓缩酶标记抗体需稀释后才能用于实验
剩余的浓缩标记抗体应装于密封瓶内，保存在4℃

• 标准品的制备：

吸取0.5ml的去离子水至标准品瓶内，轻轻并充分混匀，得到浓度为7ng/ml的人ANGPTL2标准品

• 标准品的稀释：

准备并标记8个试管，用于标准品的稀释，每管加入230ul的EIA缓冲液

常规处理注意事项
1所有试剂置于2 - 8°C保存.实验前将试剂平衡至室温(约30分钟)
2瓶装标准品是冻干品,故小心打开瓶盖
3终止液是强酸物质.使用时,避免其接触皮肤和衣肤，小心废弃
4弃置用过的物质前,用水冲洗
5 浓缩酶标抗体,EIA缓冲液和可能会出现沉淀,但这并不会影响实验
6使用试剂后，应洗手
7切勿混用不同批号或试剂盒的试剂
8别使用过期的试剂
9试剂盒仅供研究用,不能用于临床诊断.


存储与有效期
存储条件: 2 - 8°C
有效期见试剂盒外包装

实验步骤
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特别注意事项
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结果计算
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性能指标