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低温运输,-20℃保存
- 保质期:
1年
- 英文名:
pBI221-GFP(pBI221GFP)
- 库存:
大量
- 供应商:
信裕生物
质粒编号: 60908-761y
质粒名称: pBI221-GFP
其他名称:
质粒大小(bp): 4530bp
抗性: Amp+
质粒类型:
是否病毒:
启动子:
稳转或瞬转:
组成型或诱导性:
表达水平:
蛋白标签:GFP
测序引物:
GenBank号:
其他属性:
质粒图谱:
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文献和实验。 GhVP 基因的亚细胞定位 将构建好的 pBI121-GhVP∷GFP 载体用金粉包裹,把金粉包裹好的质粒加入基因枪 GDS-80 轰击洋葱内表皮细胞, 在激光共聚焦显微镜下观察。可以看出,空载体 pBI121-GFP 转化洋葱表皮后, 在整个洋葱细胞均能看到绿色荧光。pBI121-GhVP∷GFP 转化洋葱后,VP 蛋白定位于洋葱表皮细胞的细胞膜上,在玻片上加蔗糖,待质壁分离后,GhVP 蛋白在洋葱表皮细胞的细胞膜和细胞间质中均有分布(图3)。结果表明 GhVP 蛋白是 1 个跨膜蛋白, 与细胞
表达载体构建 以5'-CTTCTAGACCA GCC AGG AGA AAT CCA-3’为5’引物(下划线为引入的XbaI位点),5'-AAGGTACCAAA TTT CTG AAC GCA GC-3’作为3’引物(下划线为引入的KpnI位点)进行PCR扩增,将扩增到的片断克隆到pGFP221上,构成pGFP221-OsAGAP瞬时表达载体。 2. 基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达 1) 实验材料准备 撕取洋葱内表皮,置于高渗培养液(MS无机盐、40g/L
荧光检测选取以上检测到的花粉自发绿色荧光弱的材料,用基因枪将带有 pBI121-CA::GFP的质粒活体转化至棉花花粉,再次观察绿色荧光现象和强度,步骤如下: (1)载体质粒的提取:将带有 pBI121- CA::GFP 质粒的大肠杆菌接种到含有卡那抗生素的 LB 液体培养基中,37℃,175rpm 过夜培养,根据 OMEGA 质粒大提试剂盒操作步骤进行质粒提取,并琼脂糖电泳检测条带,测浓度备用。 (2)金粉处理(60mg/ml):首先取 30mg 金粉置于 1.5ml 离心管中,加 1ml70%乙醇
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