铁调素试剂盒

【产品名称】
通用名称：铁调素-25检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名称：Hepcidin 25 bioactive ELISA

【产品规格】
96T

【预期用途】
试剂盒可用于血清、肝素血浆中铁调素-25的体外定量检测

【前言简介】
铁调素是人体内的一种铁平衡调节多肽。活性多肽铁调素-25主要是在肝脏中产生，通过蛋白质溶解切割前铁调素的C-端的25个氨基酸所产生的。随后，N-端的铁调素-25转化为更小的多肽（大约20~24个氨基酸），这些多肽活性更低并且在尿液中累积。
尽管铁调素最初被认为是抗菌肽，但是现在已经被确立为调节铁吸收及细胞铁释放的主要调节器。铁调素发挥其调节铁平衡的作用主要是通过抵消铁转运蛋白（巨噬细胞、肝细胞细胞膜以及肠细胞底外侧的主要铁输出）来发挥的。铁调素诱导铁转运蛋白的内化及退化，从而导致细胞内的铁储存并减少饮食中铁的吸收，最终引起循环中铁浓度下降。铁调素会在循环铁浓度下降的情况下减少合成，如缺铁、缺氧、贫血以及红细胞生成等情况。相反的，在炎症以及感染的情况下，铁调素合成会增加。

【检测原理】
此试剂盒采用的是竞争酶联免疫法
微孔板上包被了能与生物活性铁调素-25分子抗原位点特异性结合的单克隆抗体；样本中的内源性铁调素与生物素化铁调素竞争结合包被抗体，温育后洗去未结合的部分；加入链霉亲和素-过氧化物酶复合物温育，洗涤；加入底物液，短时间的孵育，发生颜色变化反应；样本中铁调素浓度与颜色的强度成反比

【试剂盒组成成分】
微孔板 96孔
可拆，包被了抗铁调素-25抗体（单克隆）
标准品（0-5） 6×0.2ml
冻干品 浓度：0、2、6.5、25、45、80ng/ml 含无汞防腐剂
高低质控 2×0.2ml
冻干品 具体质控值及范围见QC质控单
分析缓冲液 1瓶 14ml
即用 含无汞防腐剂
酶复合物 1瓶 14ml
即用
酶联物 1瓶7ml
即用 含HRP标记的链霉亲和素
洗涤浓缩液 1瓶 30ml
40倍浓缩
底物液 1瓶14ml
即用 TMB
终止液 1瓶14ml
即用 0.5M硫酸，避免接触终止液，会腐蚀和烧伤皮肤
注意：若有需要可额外订购稀释样本的分析缓冲液


所需材料（未提供）
1. 酶标仪（450±10nm）
2. 校准的变量精确移液器
3. 吸水纸
4. 去离子水或双蒸水
5. 计时器
6. 半对数坐标纸或数据处理软件

【储存条件】
未开封的试剂在2-8℃下可保存至有效期，不要使用过期的试剂
开封的试剂和微孔板必须贮存于2-8℃，密封袋一旦打开后，应立即密封好
开封的试剂盒若按上述方法保存可保持2个月活性

【样本要求】
实验需使用血清或者肝素血浆样本
EDTA及柠檬酸血浆的检测结果会偏小
不要使用溶血，脂血或黄疸血样本
注意：含有叠氮化物的样本不能使用
样本的采集
血清
静脉采血采集全血，允许凝集，室温下离心分离出血清；样本未完全凝集前不能离心；含有抗凝剂的样本可能需要更长的凝集时间
血浆
采用含抗凝剂的采血管采集全血，然后马上离心采集血浆样本
样本储存和准备
样本采集后密封，2-8℃下可保存24小时；若要保存更长时间，则需冻存于≤-20℃（12个月）；避免反复冻融
初次试验中，若出现样本的浓度值高于最高标准，则需将样本进行进一步的稀释，并重新检测，最终结果应乘以相关的稀释因子
例如：
A 1:10稀释 10ul的血清+90ul的分析缓冲液（充分混合）
B 1:100稀释 10ulA液体+90ul的分析缓冲液（充分混合）