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1年
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大量
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信裕生物
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60 U
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文献和实验The Estimation of mRNA Content by Poly(U) Hybridization
(A) will form RNA-RNA hybrids with poly(U) in vitro. The poly (A) content of RNA samples can therefore be detected by hybridization with saturating amounts of 3 H-poly(U) (1 ,2 ). Following the removal of excess 3 H-poly(U) by ribonuclease treatment
模板上结合,并作为新链合成的起点。根据 RNA 模板和下游应用,有三种基本类型的引物可供选用:oligo(dT)引物、随机引物和基因特异性引物(图 3)。 图 3. 反转录中的常用引物。 ❖ Oligo(dT)引物由 12-18 个脱氧胸腺核苷酸组成,可与真核 mRNA 的 poly(A)尾退火。其为从真核生物 mRNA 构建cDNA 文库、全长 cDNA 克隆和 cDNA 3'末端快速扩增(3'RACE)的最佳选择。由于 oligo(dT)引物对 poly(A) 尾的特异性,其不适用于降解
HeliScope测序仪是由Quake团队设计开发的,它实际上也是一种循环芯片测序设备。不过,HeliScope 测序仪最大的特点是无需对测序模板进行扩增,它使用了一种高灵敏度的荧光探测仪直接对单链DNA模板进 行合成法测序。首先,将基因组DNA切割成随机的小片段DNA分子,并且在每个片段末端加上poly-A尾。然 后通过poly-A尾和固定在芯片上的poly-T杂交,将待测模板固定到芯片上,制成测序芯片。最后借助聚合酶 将荧光标记的单核苷酸掺入到引物
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