GenElute™哺乳动物总RNA小量制备试剂盒

产品名称
Application
纯化所得的RNA可直接用于反转录、PCR、标记、微阵列分析及其他常规应用。请注意，长度小于200个核苷酸的RNA（如tRNA、5S rRNA和5.8S rRNA）无法在本试剂盒所用条件下有效纯化。
General description
Sigma Life Science致力于为您提供符合一项或多项绿色化学十二条原则 （The 12 Principles of Greener Chemistry），更环保的替代产品。相对于使用苯酚和进行DNA提取的标准方法，本产品符合固有安全化学原则(Inherently Safer Chemistry)。
Sigma的GenElute哺乳动物总RNA小量制备试剂盒可以简单、方便的从哺乳动物细胞和组织中分离总RNA。该试剂盒实验方案适用于细胞、组织和纤维组织。根据细胞裂解和破碎条件，此类实验方案也会有所不同。RNA结合到GenElute Binding Column上之后，所有起始材料的纯化操作步骤均相同。用于成纤维组织时，本试剂盒必须结合蛋白酶K使用以确保能够有效地破碎细胞。（货号：P4850）该试剂盒将硅胶膜系统的优势与微量离心形式结合在一起，同时无需采用氯化铯梯度离心、乙醇沉淀，以及诸如苯酚和等有害化学成分。细胞或组织在含有异硫氰酸胍的缓冲液中裂解并均质化，以确保
大分子成分充分变性、RNases灭活。之后加入乙醇，从而使RNA在溶解物通过微量离心管在硅胶膜上离心时，结合到膜上。在洗涤去除污染物后，将RNA放在50-100 μL的洗脱溶液中洗脱。在30分钟内，至多可从总RNA中纯化出150 μg总RNA。

如果必须去除所有痕量的DNA，建议采用DNase I进行进一步处理。在RNA通过On-Column DNase I Digestion Set （DNASE10和DNASE70）结合到GenElute Binding Column上时，可同时进行DNase I降解。此外，如果需要更严格地去除污染物DNA，可采用扩增级DNase I (AMPD1)处理最终的RNA制备物。
Other Notes
GenElute™哺乳动物总RNA Purification Kit将硅胶膜技术和离心柱形式的便利性结合在一起，提供了制备优质总RNA的快速结合、洗涤和洗脱方法。
更多信息，请见www.sigma-aldrich.com/totalrna。
Features and Benefits
每次制备纯化出多达107个细胞或40 mg组织中的总RNA
每次制备至多可获得150 μg高纯度浓缩总RNA
可从低至100个细胞的样本中分离出RNA
简单且高效 - 可在30分钟内完成12至18次制备
相对于重力流离子交换法，速度更快
无需进行与树脂和磁力悬浆相关的繁琐步骤
相比于行业内领先的供货商，每试剂盒可多纯化40%的产物
Principle
样本首先在硫氰酸胍和2硫基乙醇中裂解，以便释放出RNA并灭活RNases。裂解物通过滤柱进行离心，以去除细胞残渣并剪切DNA。随后将滤液移入高容量硅胶柱中以便结合总RNA，之后再进行洗涤和洗脱。每次采用100 μl水进行制备时，至多可纯化出150 μg总RNA。纯化所得的RNA可直接供Northern杂交（图1）、RT-PCR（图2）和其他常规应用使用。
法律信息
GenElute 为以下机构的商标： Sigma-Aldrich Co. LLC
性质
Related Categories 12 Principles Aligned Products, Chemical Synthesis, Core Bioreagents, DNA和RNA纯化, Functional Profiling of Stem Cells,
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usage sufficient for 70 purifications
greener alternative product characteristics Designing Safer Chemicals
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