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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 库存:
837
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
50T/200T
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式)厂家现货在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式)厂家现货
品牌:百奥莱博
编号:XH007
产地:国产|进口
规格:50T/200T
原理简介
真菌是具有真核和细胞壁的异养生物。种属很多,已报道的属达1万以上,种超过10万个。真菌通常又分为三类,即酵母菌、霉菌和蕈菌(大型真菌)。对于酵母菌和霉菌,可以用玻璃珠处理,而对于大型真菌,可直接用液液氮研磨。经过前期处理的菌液,再经过裂解液及蛋白酶处理后,玻璃奶吸附DNA,去掉其他杂质,,可得到高纯度的基因组。提取纯化后的DNA,可以直接用于 PCR/Real time-PCR,sequencing,Southern blot,mutant analysis,SNP 等下游应用实验。
注意事项
1.由于真菌种类万千,对于一些特别难处理的真菌,可用液氮研磨,再用玻璃珠振荡,蛋白酶K处理,一般都可以得到一定量的基因组DNA,如电泳检测很弱,一般PCR都会有较好结果。
2.如果DNA提取量很少,可加长玻璃珠处理时间,如果提取DNA*(代"片")段很短,成弥散条带,可减少玻璃珠处理时间。
操作步骤
1.样品的处理:
1)对于酵母菌,取1-2ml培养好的菌液,离心收集,弃上清。加入300ul 裂解液,加入10ul RNase A,再加入100mg玻璃珠,在高速振荡器上振荡,约5-10min。
2)霉素(孢子也可相同处理):取50-100mg菌丝,加300ul裂解液,用玻璃研磨器适当研磨分散菌丝,加入10ul RNase A,再加入100mg玻璃珠,在高速振荡器上振荡,约30min。
3)大型真菌(如蘑菇等):称取50-100mg样品,倒入适量的液氮,立即研磨重复3 次,使样品研成粉末(如无液氮,可加300ul裂解液后用玻璃研磨器适当研磨),加300ul裂解液,加入10ul RNase A,再加入100mg玻璃珠,在高速振荡器上振荡,约5min。
2.加入10ul 10mg/ml的蛋白酶K,充分混匀,55℃水浴消化,15-30min。消化期间可颠倒离心管混匀数次。
3.12000转离心2min。将上清转移到一个新的离心管中。如有沉淀,可再次离心。
4.在上清中加入三倍体积无水乙醇,充分混匀。
5.12000rpm离心5分钟,去上清,核酸在沉淀中。
6.沉淀中加入500ul结合液,55℃水浴1-2分钟,核酸沉淀可溶解。
6.玻璃奶摇匀。加入50ul摇匀的玻璃奶,混匀,室温放置2分钟,10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
7.室温放置10分钟(如果玻璃奶加量,请适当延长放置时间,此步为去除残余酒精,以免影响下游实验),加入50-100ul TE缓冲液混匀溶解,55℃水浴5分钟。离心,取上清为所提基因组。
8.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
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·AEC显色试剂盒(20×)
编号:XH104
规格:1ml/10ml
试剂盒组成:
溶液A 1ml/10ml
溶液B 1ml/10ml
溶液C 1ml/10ml
保存温度:2-8度。
此试剂盒一共可以配制20ml或者200ml显色液。
取1ml 双蒸水或者单蒸水,加入ABC溶液各一滴,混匀却可使用。此试剂现用现配。最好是镜下控制显色(用低倍镜,在显微镜下观察,如果显出阳性,可以立刻放入水中终止显色)。
3-氨基-9-乙基咔唑 (3-amino-9-ethylcarbazole,AEC) 是过氧化物酶 (Peroxidase) 的生色底物,在过氧化物酶的催化下,过氧化氢氧化AEC形成稳定的红色沉淀产物。该红色产物不溶于水,但溶于有机溶剂。该AEC底物显色试剂盒加入了增强显色试剂,敏感度大大提高。产品操作便捷,显色清晰,重复性好,适用于HRP系统的IHC和Western Blot实验的酶促显色。由于AEC生成的颜色产物为脂溶性,因此用于IHC显色后不适合梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,须用水性封片剂封片。
配制方法
A:80mg AEC 加入10ml DMF
B: 1 M NaAc(PH5.5) 10ml
C:100ul 30%H2O2 加水10ml
如果用量大,可以订购AEC干粉
真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式)厂家现货关键词:非柱式,百奥莱博,真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式),XH007
BL0895 FITC标记兔抗人IgM抗体
PY01-064 丙酮酸钠 25克
BL1434 1M Tris-HCl(PH=7.0)
SJ0778 磷酸组胺
ARB13787 豚鼠白介素1受体拮抗剂(IL1RA)Elisa定量检测 Guinea pig interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA KIT
D-鸟氨酸盐酸盐 Caffeic acid 16682-12-5
肌酐酶 Soy Isoflavones 9025-13-2
J0308 兔抗大鼠IgG(H+L)抗血清
D-酪氨酸甲酯盐酸盐 EAH Sepharose 4B 3728-20-9
ARB12475 大鼠前列腺素E1(PGE1)检测服务 Rat prostaglandin e1,pg-e1 ELISA KIT
5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷 PAAS 7240-90-6
ARB11688 人葡萄糖氧化酶(GOD)elisa检测 Human glucose oxidase,god ELISA KIT
PY02-168 豆粉琼脂 250克
肉桂酸 Azlocillin sodium 140-10-3
硫代乳酸 3-Nitrobenzene sulfonic acid sodium salt 107-96-0
1132-61-2 MOPS 3-(N-玛啡啉)丙磺酸
H1201 驴血浆(去红细胞、无菌过滤)
BL0865 羊抗人白蛋白免疫血清
真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式)厂家现货关键词:非柱式,百奥莱博,真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式),XH007
·质粒DAN提取试剂盒
编号:XH013
规格:100T/500T
原理简介
本试剂盒是在经典的质粒提取方法上改进而来,利用玻璃奶吸附质粒,代替有毒的酚氯*(代"仿")抽提,得到的DNA可用于常规下游应用实验,但可能并不适用于转染(转染请选去内毒素质量提取试剂盒。本试剂盒(以100T为例)可以用100小次或者5大次提取。
注意事项
1.溶液Ⅱ低温时可能出现析出和沉淀,可以37度水浴几分钟即可恢复澄清透明。用完请及时盖紧盖子。
2.溶液Ⅰ中加入RNaseA后请放2-8度保存,如果长久不用(如一个月),可-20度冻存,或者按照比较分次加入。
3.可根据实验情况中量或者大量提取,加入的试剂等比放大。
操作步骤(以小量提取为例,中提或者大提可等比例加入)
在溶液Ⅰ中加入RNaseA,混匀,2-8度保存。
1.取过夜菌1-5毫升,5000g离心1分钟收集细菌沉淀,弃上清(可重复多次收集于一管中,收集量可考虑菌液浓度与质粒拷贝数),如为阳性细菌,可加入100mg/ml的溶菌酶悬浮菌液,37度处理30分钟,离心,收集沉淀。
2.在收集的菌液中,加入150ul溶液I,重悬细菌沉淀。确保沉淀完全散开,无可见细菌团块(可vortex 5-10秒或更长时间)。室温放置2-3分钟。
3.每管加入150ul溶液Ⅱ(如有沉淀,可37度水浴),轻轻颠倒离心管4-6次,使细菌完全裂解,溶液透明。放置2-3分钟,不过超过5分钟。但也不要混匀后立刻加入溶液Ⅲ。
4.放置2-3分钟后,每管加入150ul溶液III,随即颠倒离心管4-6次混匀,可见白色絮状物产生。
5.最高速(13,000rpm左右)室温离心5分钟。
6.将上清转移到新的离心管中,如有沉淀,可再次离心。
7.玻璃奶摇匀。
8.在第6步的上清中加入50ul混匀的玻璃奶,混匀。室温放置5分钟,期间颠倒2次。
9.10000转/分钟离心1分钟,倒掉上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
7.室温放置10分钟(如果为大提,请延长放置时间到30分钟,此步为去除残余酒精,以免影响下游实验),加入50-100ulTE缓冲液混匀溶解,55℃水浴5分钟。离心,取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
8.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
北京百莱博科技有限公司是DNA纯化产品的专业生产供应销售商,恭候您的咨询选购真菌基因组DNA提取试剂盒(非柱式)厂家现货。
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文献和实验等 C1803 非水溶性封片剂 10ml 50 使用后组织收缩较明显 C1804 抗荧光衰退封片剂(适用荧光封片) 10ml 250 封片后保存1周 (4 ℃ ),1 月 (-20 ℃ ) 说明:该封片剂效果独特,视觉清晰,明显优于含甘油、乙烯和酒精或普通的抗褪色
等 C1803 非水溶性封片剂 10ml 50 使用后组织收缩较明显 C1804 抗荧光衰退封片剂(适用荧光封片) 10ml 250 封片后保存1周 (4 ℃ ),1 月 (-20 ℃ ) 说明:该封片剂效果独特,视觉清晰,明显优于含甘油、乙烯和酒精或普通的抗褪色
苯酚,基因组 DNA 的残留量都是比较高的。TRIzol 及其它原理为酸性酚的方法/试剂出现基因组 DNA 的残留,多与样品过量有关;同时也与吸取上清的操作不当有关。问题二:条带清晰,但有弥散。首先肯定是有基因组 DNA 的残留,但为什么会弥散?如果非常亮,弥散可以由上样过量导致。如果不是很亮,则看加样孔:加样孔不亮,提示高盐残留;加样孔很亮,则见下面。4 加样孔。这个位置提供的是杂质残留的信息。导致加样孔发亮的原因非常多,其中最主要的是非蛋白质/非核酸类的大分子杂质 (如多糖、多酚
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