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文献和实验1. 前言 植物线粒体通过产生 ATP 为植物细胞提供能源。同时,它产生的三羧酸能为植物细胞的氮同化作用以及氨基酸合成提供充足的前体物质。有关线粒体在植物发育、生殖、育性、病敏感性及细胞程序性死亡等生理过程中的作用已有大量研究。据估计,植物线粒体内包含有 1000~1500 种蛋白质。迄今为止,已经通过蛋白质组手段鉴定了几百种蛋白质的存在。在分离线粒体的过程中,必须避免使用超渗或低渗的缓冲系统,以免线粒体破裂或变形;同时还应注意避免其他细胞组分破裂后释放出对分离完整线粒体。2.1 植物
化合物的有效结合剂。在提取线粒体时加入可溶性PVP,提取可溶性酶时加入不溶性交联PVP(Polyvinyl polypyrrolidone,简称PVPP,或PolyclarAT),能有效地降低提取液中酚的含量。PVPP含有微量金属元素及PVP单体,可加10%HCl煮沸10分钟,用NaOH中和,再用水洗几次,直至中性,纯化后的PVPP不必干燥就可直接应用。 植物细胞有坚韧的细胞壁,需要强烈的方法去破碎,少量样品可用研钵加石英砂研磨,或用玻璃匀浆器。大量样品则需用电动匀浆器。为减低研磨或匀浆过程中
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