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文献和实验数后,软件才能自动生成标准曲线。建议标准品的浓度在5点以上。建议每个样品(包括标准品)都按照统计学要求作一定数量的复管。6、参比荧光如果使用的是ABI公司的定量PCR试剂,如TaqMan Universal PCR Master Mix或者SYBR Green PCR Master Mix等,参比荧光(Passive Reference)选ROX;如果使用的试剂中不含有参比荧光,请选None。完成后点击右上角的X按钮,关闭Well Inspector窗口。7、循环参数切换到Instrument页面,设定
荧光定量PCR(也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR)是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术,该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与变通PCR相比,FQ-PCR具有许多优点。本文拟就该技术的特点、原理和方法以及应用作一简要叙述。一、特点FQ-PCR不仅具有普通PCR的高灵敏性,而且由于荧光探针的应用,可以通过光电传导系统直接探测PCR扩增过程中荧光信号的变化以获得定量结果,所以还具有DNA杂交的高特异性和光谱技术
Real time PCR-ABI Prism 7000[MIT]
whitehead institute center for microarray technology(WICMT),MIT ABI7000 use notes ,131k,word文档 http://www.wi.mit.edu/CMT/protocols/ABI7000RT_vCMT1.doc Primer Express ,96页,PDF格式 http://www.wi.mit.edu/CMT/protocols/ABI7000RT
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