非冻型细菌RNA保存液（60-10）

【共享】【分享】qRT-PCR(双论坛共享版)

,即:引物探针的保存一般遵循以下原则:1.正向和反向引物保存在-20度, 浓度为10mM 或者10×工作浓度.探针应该避光保存，贮存在-70度,最好以冻干粉状态，工作浓度的液体保存一般两周左右。2. 输入靶序列，用BLASTn进行比对3. 检查比对序列的多态性以及可能的错误避免这些区域来进行引物和探针设计4. 在靶序列中避免直接待重复区，在重复区进行杂交容易使得引物非获得产物性结合，降低DNA的扩增效率以及减少分析的灵敏度。5. 考虑到潜在的剪接变异体以及合适的所需要的获得到靶，通过生物信息学分析内含

一文读懂 CRISPR 编辑技术

成熟的 crRNA。在 II 型系统中，Pre-crRNA 可通过重复序列与其互补序列 transacting RNA（trancrRNA）反式结合，然后在 Cas9 存在的情况下被 RNaseIII 加工融合成一个 sgRNA。目前，II 型系统是最成熟也是应用最广的类型，而 Cas9 已经变成了在多种细胞类型和组织中靶向基因编辑的强大工具。第三阶段：靶向干扰（Target interference）I 型和 II 型系统均可靶向含有与 PAM 和 protospacer 互补序列的 dsDNA

【心得】关于全血的保存-DNA提取-pcr个人经验（经常在线回复）（血中rna提取在后边ps：5）（组织中提DNA ps6）

-20kb。浓度走个mark比一下亮度就可以了（4ul上样）产率：人血100ul有3-6ug吧经验估计看你保存的和样本来源了ps1：提取基因组时候同时线粒体DNA也被提取了，我试过ps2：pcr美微升10ng运气好就可以跑出来了，只要你电泳4ul上样可以看得到条带基本都可以做25ulpcr加1-6ulDNA当pcr不稳地的时候可以多加点DNA尝尝有帮助ps3：提取组织中的DNA可以用trizol，顺便也提取RNA，只提取的话用自己去查ps4：一般来说沉淀法300ul血加溶解液100ul，离心柱发