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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
负20度
- 保质期:
2年
- 英文名:
pQE-80
- 库存:
100
- 供应商:
kelei-bio
- 规格:
20μl
详细请登录网站查询 www.kelei-biology.com.或发邮件至1722105945@qq.com,(QQ:1722105945)我们会第一时间给您回复。
柯雷生物拥有数万种质粒,菌种,基因,细胞株,试剂盒等科研资源,还提供基因合成,质粒改造,载体构建和蛋白表达等精品实验服务
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文献和实验蛋白;如果是纯化过程中蛋白易降解,则可以在纯化试剂中加入甘油以及蛋白酶抑制剂,并且确保整个操作在4度完成。 2、如何在E. coli中表达高度毒性的蛋白? 在E. coli中表达高度毒性的蛋白往往是很困难的。毒性基因表达‘泄漏’会杀死宿主菌,尤其在早期的生长或转化后,可以使含有突变的不表达质粒的细菌选择性生长。因此,要表达高毒性的蛋白,需要更高水平的lac 抑制蛋白。推荐同时使用QIAGEN公司的pQE-80L系列表达载体和M15[pREP4]宿主菌。pQE-80L系列表达载体带有lac抑制子基因,宿主
-16、pQE-40,使生成目标多肽与DHFR的融合蛋白;如果是纯化过程中蛋白易降解,则可以在纯化试剂中加入甘油以及蛋白酶抑制剂,并且确保整个操作在4度完成。 2、如何在E. coli中表达高度毒性的蛋白? 在E. coli中表达高度毒性的蛋白往往是很困难的。毒性基因表达‘泄漏’会杀死宿主菌,尤其在早期的生长或转化后,可以使含有突变的不表达质粒的细菌选择性生 长。因此,要表达高毒性的蛋白,需要更高水平的lac 抑制蛋白。推荐同时使用QIAGEN公司的pQE-80L系列表达载体和M15
出所需的重组质粒。 仪器、材料与试剂 一、仪器 1.恒温摇床 2.恒温水浴 3.恒温培养箱 4.小型高速离心机 二、材料 1. 氨苄青霉素 2. BamHI 3. HindIII 4. T4 DNA连接酶 5. pQE-31 和pUC18-CAT 质粒 6. 培养皿 7. 接种针 8. 金属涂棒 9. 1.5mL 离心管 10.酒精灯 11.镊子、灭菌牙签等 三、试剂 DNA琼脂糖胶纯化试剂盒 实验步骤 一、质粒
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