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文献和实验THP-1 是人单核细胞白血病细胞,是单核巨噬细胞分化、炎症、免疫相关研究常用悬浮模式细胞。细胞悬浮生长,状态佳时大小均一、折光性强,部分细胞会自然聚集成小团,对血清、培养基和细胞密度均高度敏感,状态极易受环境、操作、血清质量影响,本文将针对THP-1的细胞培养流程进行梳理和指导。 一、细胞复苏 1.【准备工作】水浴锅提前预热至 37℃;准备 9ml 培养基在37℃条件下预热;生物安全柜提前使用紫外照射 30min; 2.【融化】从液氮取出冻存管,37℃水浴快速摇晃融化,约 1-2
我养过皮肤成纤维细胞和THP-1细胞。皮肤成纤维细胞是贴壁生长的。THP-1细胞是悬浮的。由于我们实验室养细胞的时间也不是很长,所以也只能说说自己平时的操作了。先说皮肤成纤维细胞。当细胞铺满瓶底,也就是细胞与细胞之间没有间隙时,就可以传代了。一般十天左右传一代。先吸弃旧培养液,用D-Hanks液洗两遍,再加入0.25%的胰酶,加入的量以能覆盖瓶底为准。加入后轻轻摇晃培养瓶使液体覆盖瓶底,然后静置两分钟左右,最好是能在显微镜下观察,当细胞之间出现间隙且有一部分细胞呈现圆形后即可。吸去胰酶,加入含
慢病毒 hTLv 感染人原代 CD4+ T 细胞 图 4:悬浮细胞专用腺病毒 ADS 感染人原代 CD4+ T 细胞 四、其他的一些常见特殊细胞系 ①THP-1 细胞 THP-1 是人单核细胞白血病细胞,是一种悬浮细胞。慢病毒感染悬浮细胞步骤可以参考上文。 图 5:慢病毒感染 THP-1 细胞 THP-1 细胞培养和感染注意事项: 换液时需预热培养基; THP-1 细胞对血清要求较高,品质好的血清有利于 THP-1 的生长; THP-1 细胞生长存在密度依赖性,密度较低时,生长较慢,培养密度
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