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文献和实验Noggin(Cat # 6057-NG)和 EGF(Cat # 236-EG)等 R&D Systems® 的细胞因子来进行类器官培养。 为什么 R&D Systems® 的重组蛋白能受到这些大牛们的青睐呢? ① 首先,高活性的细胞因子能够让类器官保持良好的生长状态,且达到同样的刺激效果所需的用量更为经济。②其次,高度的批次间稳定性,可以确保实验的重复性,获得的实验结果更可靠。除以上三种蛋白,R&D Systems® 的重组 Noggin 蛋白也具有同样的高批次间稳定性。且采用 3 个独立批号
基因组 DNA 为模板进行 PCR 扩增,电泳确认 PCR 产物大小,对大小正确的产物进行测序,如测序结果与理论序列一致,则确认该基因编辑小鼠模型为正确重组模型。 TIPS 双臂 PCR 产物需测通:我们在实践中发现,即使 Donor 序列完全正确,部分鼠会存在突变或片段缺失的情况,我们推测是细胞在 Donor 重组前或过程中对 Donor 发生了编辑或重组后结构不稳定等原因所致,所以只对 Donor 各个部分接头测序是不严谨的,建议测通。 下面以 CKO 模型鉴定为例说明双臂 PCR 鉴定
之前承诺大家的小鼠「干货」已经出炉啦。上期不少同学留言表示想了解基因修饰小鼠相关的知识,这次我们把转基因、基因敲除、基因敲入、条件性基因敲除繁育方案给一次性讲透,教会大家如何正确地给小鼠找对象,组织好这场「包办婚姻」。转基因转基因阳性小鼠与野生型小鼠交配TG × WT这里说的转基因,并非广义上的所有的基因修饰,而是特指外源基因随机地整合到小鼠染色体上获得的随机插入转基因小鼠。通过受精卵显微注射的方式,通常我们会获得很多个带有外源基因插入的首建鼠(Founder)。每一个首建鼠,外源
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