| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pDONR221 |
| 质粒类型: | Gateway载体；克隆载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 启动子: | -- |
| 克隆方法: | Gateway ; BP反应 |
| 载体大小: | 4762 bp |
| 5' 测序引物及序列: | M13-F(-20): GTAAAACGACGGCCAG |
| 3' 测序引物及序列: | M13-R: CAGGAAACAGCTATGAC |
| 载体标签: | -- |
| 载体抗性: | 卡那霉素/ 氯霉素 |
| 筛选标记: | -- |
| 备注: | pDONR221载体本身含有CCDb致死基因，能够使得普通的DH5alpha等细菌死亡，必须使用DB3.1感受态细胞进行质粒扩增； 构建Gateway系统入门克隆时需要使用ccdB敏感的 OmniMAX2感受态细胞。 |
| 产品目录号: | 12536-017 |
| 稳定性: | -- |
| 组成型: | -- |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
- ¥800
- ZYbscience
- 中国/美国
- ZY12536-017
- 2025年07月15日
11 年钻石会员
企业认证
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃低温保存
- 保质期：
三年
- 英文名：
pDONR221
- 库存：
20
- 供应商：
泽叶生物
载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验相关实验
用传统的限制酶切和连接的方法产生入门克隆。这些载体配合合适的目的载体，可以用于表达天然蛋白或带有N端或C端融合标签的重组蛋白。为了在真核细胞中有效地翻译蛋白，所有的5个Gateway入门载体提供了Kozak 序列。此外，pENTR11提供了SD （Shine-Dalgarno）序列，便于在大肠杆菌中有效的翻译。2、PCR重组克隆 重组是从PCR产物创建Gateway入门克隆的另一种方法。这种方法是通过合并attB位点到上游和下游引物上，然后共同孵育PCR扩增产物和pDONR载体（包含attP位点
是线性的，如果用质粒必须做酶切，但是事实证明用超螺旋的质粒结果没有区别。5. 同理，用引物在目的基因上下游加入AttL序列后直接进行LR反应也是可行的，可以省去BP反应相关的材料和费用。但是pDONR系列载体自有其优点（载体小，拷贝数高，卡那霉素抗性，容易测序），所以要按实际情况权衡6. 慢病毒载体的空白质粒有大量的重复序列，久存会导致LR反应成功但是转化后抽不出质粒的情况，需要注意。
3. 用SuperScript™ II逆转录酶合成第一链和第二链cDNA 4. 连接attB1接头 5. 加上接头的cDNA和pDONR™222载体混合在BP Clonase™酶存在时构建入门文库 6. 得到的入门克隆有attL位点；产生的副产物是自由的ccdB基因 7. 转化E.coli并选择抗卡那霉素的克隆
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
pDONR221载体
¥800
