pGAPZ B载体

pGAPZ B载体

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  • ZYbscience
  • 中国/美国
  • ZY200-20
  • 2025年07月13日
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      三年

    • 英文名

      pGAPZ B

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      20

    • 供应商

      泽叶生物

    pGAPZB载体基本信息

    出品公司: ZYbscience
    载体名称: pGAPZ A, pGAPZ-A, pGAPZA
    质粒类型: 毕赤酵母蛋白表达载体
    表达水平: 高拷贝
    启动子: GAP
    克隆方法: 多克隆位点,限制性内切酶
    载体大小: 2882 bp
    5' 测序引物及序列: pGAP-F:5´-GTCCCTATTTCAATCAATTGAA-3´
    3' 测序引物及序列: 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´
    载体标签: C-Myc, C-His
    载体抗性: Zeocin 博来霉素
    筛选标记: HIS4/ Zeocin
    备注:
    插入基因是必需包含起始密码子ATG。
    产品目录号: ZY200-20
    稳定性: 稳定 Stable
    组成型: 组成型 Constitutive
    病毒/非病毒: 非病毒

    pGAPZB载体质粒图谱和多克隆位点信息

    pGAPZ B载体图谱

    pGAPZ B多克隆位点

    pGAPZB载体简介

    甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的酶在许多生物细胞中包括毕赤酵母,稳定高水平表达。 最近,GAPDH蛋白编码基因启动子(GAP)被深入研究,并在毕赤酵母中能够高水表达重组蛋白,这取决于使用的碳源(Waterham等 人,,1997)。GAP启动子(PGAP)的重组蛋白表达水平略高于AOX1启动子。

    pGAPZ A,B,和C载体(2.9 KB)和pGAPZα,B,和C(3.1 KB)载体使用GAP启动子在毕赤酵母中稳定表达重组蛋白。重组蛋白表达为为带有C-末端myc抗原表位和C端His标签的融合蛋白。此外,pGAPZα 表达的融合蛋白在N-端带有酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的α-因子分泌信号肽。这两个系列的载体都提供三个不同读码框的载体,以方便克隆的带有C-端标签和/或N-末端分泌信号肽的载体 中。

    这些载体是基于显性选择标记,Zeocin(博莱霉素)的筛选标记可以同时使用于毕赤酵母和大肠杆菌。

    pGAPZB载体序列

    LOCUS       pGAPZ B           2882 bp ds-DNA    circular SYN 05-二月-2013
    DEFINITION  Pichia pastoris vector for constitutive intracellular expression of 
                a protein.
    ACCESSION   .
    VERSION     .
    KEYWORDS    pGAPZ B
    SOURCE      synthetic DNA construct
      ORGANISM  synthetic DNA construct
    COMMENT     This file is created by Vector NTI
                http://www.biofeng.com/
    COMMENT     VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
    COMMENT     Linearize within the GAP promoter for integration.
    FEATURES             Location/Qualifiers
         source          1..2882
                         /organism="synthetic DNA construct"
                         /lab_host="Pichia pastoris"
                         /mol_type="other DNA"
         promoter        7..483
                         /note="GAP promoter"
                         /note="promoter for Pichia pastoris 
                         glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase"
                         /note="color: #ffffff; direction: RIGHT"
         misc_feature    484..563
                         /note="MCS"
                         /note="multiple cloning site"
                         /note="color: #99ccff"
         CDS             562..591
                         /codon_start=1
                         /product="Myc (human c-Myc oncogene) epitope tag"
                         /note="Myc"
                         /note="color: #cc99b2"
                         /translation="EQKLISEEDL"
         CDS             607..624
                         /codon_start=1
                         /product="6xHis affinity tag"
                         /note="6xHis"
                         /note="color: #cc99b2"
                         /translation="HHHHHH"
         terminator      703..949
                         /gene="Pichia pastoris AOX1"
                         /note="AOX1 terminator"
                         /note="transcription terminator for AOX1"
                         /note="color: #ffffff"
         promoter        964..1375
                         /gene="S. cerevisiae TEF1"
                         /note="TEF1 promoter"
                         /note="promoter for?EF-1-alpha"
                         /note="color: #ffffff; direction: RIGHT"
         promoter        1382..1429
                         /note="EM7 promoter"
                         /note="synthetic bacterial promoter?"
                         /note="color: #ffffff; direction: RIGHT"
         CDS             1448..1822
                         /codon_start=1
                         /gene="Sh?ble from?Streptoalloteichus hindustanus"
                         /product="antibiotic-binding protein"
                         /note="BleoR"
                         /note="confers resistance to bleomycin, phleomycin, and 
                         Zeocin(TM)"
                         /note="color: #ccffcc"
                         /translation="MAKLTSAVPVLTARDVAGAVEFWTDRLGFSRDFVEDDFAGVVRDD
                         VTLFISAVQDQVVPDNTLAWVWVRGLDELYAEWSEVVSTNFRDASGPAMTEIGEQPWGR
                         EFALRDPAGNCVHFVAEEQD"
         terminator      1888..2135
                         /gene="S. cerevisiae CYC1"
                         /note="CYC1 terminator"
                         /note="transcription terminator for CYC1"
                         /note="color: #ffffff"
         rep_origin      complement(2210..2798)
                         /direction=LEFT
                         /note="ori"
                         /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                         replication"
                         /note="color: #ffff00"
    ORIGIN
            1 agatcttttt tgtagaaatg tcttggtgtc ctcgtccaat caggtagcca tctctgaaat
           61 atctggctcc gttgcaactc cgaacgacct gctggcaacg taaaattctc cggggtaaaa
          121 cttaaatgtg gagtaatgga accagaaacg tctcttccct tctctctcct tccaccgccc
          181 gttaccgtcc ctaggaaatt ttactctgct ggagagcttc ttctacggcc cccttgcagc
          241 aatgctcttc ccagcattac gttgcgggta aaacggaggt cgtgtacccg acctagcagc
          301 ccagggatgg aaaagtcccg gccgtcgctg gcaataatag cgggcggacg catgtcatga
          361 gattattgga aaccaccaga atcgaatata aaaggcgaac acctttccca attttggttt
          421 ctcctgaccc aaagacttta aatttaattt atttgtccct atttcaatca attgaacaac
          481 tatttcgaaa cgaggaattc acgtggccca gccggccgtc tcggatcggt acctcgagcc
          541 gcggcggccg ccagctttct agaacaaaaa ctcatctcag aagaggatct gaatagcgcc
          601 gtcgaccatc atcatcatca tcattgagtt ttagccttag acatgactgt tcctcagttc
          661 aagttgggca cttacgagaa gaccggtctt gctagattct aatcaagagg atgtcagaat
          721 gccatttgcc tgagagatgc aggcttcatt tttgatactt ttttatttgt aacctatata
          781 gtataggatt ttttttgtca ttttgtttct tctcgtacga gcttgctcct gatcagccta
          841 tctcgcagct gatgaatatc ttgtggtagg ggtttgggaa aatcattcga gtttgatgtt
          901 tttcttggta tttcccactc ctcttcagag tacagaagat taagtgagac cttcgtttgt
          961 gcggatcccc cacacaccat agcttcaaaa tgtttctact ccttttttac tcttccagat
         1021 tttctcggac tccgcgcatc gccgtaccac ttcaaaacac ccaagcacag catactaaat
         1081 tttccctctt tcttcctcta gggtgtcgtt aattacccgt actaaaggtt tggaaaagaa
         1141 aaaagagacc gcctcgtttc tttttcttcg tcgaaaaagg caataaaaat ttttatcacg
         1201 tttctttttc ttgaaatttt tttttttagt ttttttctct ttcagtgacc tccattgata
         1261 tttaagttaa taaacggtct tcaatttctc aagtttcagt ttcatttttc ttgttctatt
         1321 acaacttttt ttacttcttg ttcattagaa agaaagcata gcaatctaat ctaagggcgg
         1381 tgttgacaat taatcatcgg catagtatat cggcatagta taatacgaca aggtgaggaa
         1441 ctaaaccatg gccaagttga ccagtgccgt tccggtgctc accgcgcgcg acgtcgccgg
         1501 agcggtcgag ttctggaccg accggctcgg gttctcccgg gacttcgtgg aggacgactt
         1561 cgccggtgtg gtccgggacg acgtgaccct gttcatcagc gcggtccagg accaggtggt
         1621 gccggacaac accctggcct gggtgtgggt gcgcggcctg gacgagctgt acgccgagtg
         1681 gtcggaggtc gtgtccacga acttccggga cgcctccggg ccggccatga ccgagatcgg
         1741 cgagcagccg tgggggcggg agttcgccct gcgcgacccg gccggcaact gcgtgcactt
         1801 cgtggccgag gagcaggact gacacgtccg acggcggccc acgggtccca ggcctcggag
         1861 atccgtcccc cttttccttt gtcgatatca tgtaattagt tatgtcacgc ttacattcac
         1921 gccctccccc cacatccgct ctaaccgaaa aggaaggagt tagacaacct gaagtctagg
         1981 tccctattta tttttttata gttatgttag tattaagaac gttatttata tttcaaattt
         2041 ttcttttttt tctgtacaga cgcgtgtacg catgtaacat tatactgaaa accttgcttg
         2101 agaaggtttt gggacgctcg aaggctttaa tttgcaagct ggagaccaac atgtgagcaa
         2161 aaggccagca aaaggccagg aaccgtaaaa aggccgcgtt gctggcgttt ttccataggc
         2221 tccgcccccc tgacgagcat cacaaaaatc gacgctcaag tcagaggtgg cgaaacccga
         2281 caggactata aagataccag gcgtttcccc ctggaagctc cctcgtgcgc tctcctgttc
         2341 cgaccctgcc gcttaccgga tacctgtccg cctttctccc ttcgggaagc gtggcgcttt
         2401 ctcaatgctc acgctgtagg tatctcagtt cggtgtaggt cgttcgctcc aagctgggct
         2461 gtgtgcacga accccccgtt cagcccgacc gctgcgcctt atccggtaac tatcgtcttg
         2521 agtccaaccc ggtaagacac gacttatcgc cactggcagc agccactggt aacaggatta
         2581 gcagagcgag gtatgtaggc ggtgctacag agttcttgaa gtggtggcct aactacggct
         2641 acactagaag gacagtattt ggtatctgcg ctctgctgaa gccagttacc ttcggaaaaa
         2701 gagttggtag ctcttgatcc ggcaaacaaa ccaccgctgg tagcggtggt ttttttgttt
         2761 gcaagcagca gattacgcgc agaaaaaaag gatctcaaga agatcctttg atcttttcta
         2821 cggggtctga cgctcagtgg aacgaaaact cacgttaagg gattttggtc atgcatgaga
         2881 tc
    //

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