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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
6-12months
- 英文名:
Recombinant YY1 Transcription Factor (YY1)
- 库存:
大量
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
50ug/100ug/1mg
上海泽叶生物科技有限公司是一家集研发、生产和销售于一体的生命科学实验室产品创新性高科技企业。主要从事免疫学,重组蛋白,细胞因子,抗原/多肽/蛋白等产品主要包括免疫调节蛋白、白细胞介素、CSFs、生长因子、干扰素、Chemokines 、Adipokines 、TGFß / BMP Proteins、神经因子、FGFs和TNF配体/受体防御因子等。并代理销售Amresco,qiagen Millipore,eBioscience,Sigma,SANTA,Sciencell,R&D、GBD、ATCC、HYCLONE, CELLutions Biosystems INC , Neuromics , Chemicon, Equitech-bio, Biovision, Promega, Kamiya, Prospec, Cytoskeleton, Novagen, SurModics, Cytelligen LONZA等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务。
经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。
抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时,浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。
1、pH的应用范围及选择
抗原修复液的pH非常重要,有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要,同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强,但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效,而对固定很长时间旧的存档组织,酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。
2、抗原修复时应选择最佳温度
70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性,但经福尔马林固定的蛋白质,温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示,温度为92-98℃是合适的,95℃效果最好。
3、抗原修复液必须遵循自然降温规律,否则效果不好或达不到抗原修复的目的
抗原修复持续时间过后,取出放于室温中让其慢慢地降温,绝对不能为了争取时间,强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结,要有一个自然环境让其自然放松下来,随着温度的降低,它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。
4、尽量使用足量的抗原修复液
应用于抗原修复的液体,一定要充足,防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时,由于它的量较大,可延缓液体的沸腾时间,增加切片受微波辐射的量,对抗原修复将达到彻底。
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文献和实验9.23 上交复旦Science子刊揭示靶向YY1有望治疗糖尿病肾病
① 上交复旦Science 子刊揭示靶向 YY1 有望治疗糖尿病肾病转化生长因子β1(TGFβ1,由基因 TGFB1 编码)已被确定为糖尿病肾病产生的主要致病因子。然而,当前的拮抗 TGFβ1 的策略未能在临床试验中表现出有益的治疗结果。在一项新的研究中,来自中国上海交通大学和复旦大学等研究机构的研究人员为了鉴定出一种不同的治疗方法,设计出一种基于质谱的 DNA-蛋白相互作用筛选方法,以便发现与 TGFβ1 启动子结合的转录阻遏物。他们鉴定出一种称为阴阳 1(Yin Yang 1, YY1
的研究表明向淋系分化能力的减损是衰老 HSPC 的重要特征,该研究发现年轻血液暴露能上调老年个体 HSPC 中与淋系分化潜能相关的基因表达,并恢复骨髓中淋系细胞(如祖 B 细胞)的数量。 结合差异基因表达、核心调控转录因子和细胞-细胞间通讯分析,研究团队发现了一系列以表观调控基因 YY1 以及细胞趋化因子 CCL3 为代表的 HSPC 衰老调控因子。结果显示,YY1 的表达降低与 HSPC 老化密切相关,但其表达水平对年轻血液刺激缺乏足够响应性,而在衰老 HSPC 中被抑制的 CCL
启动子和增强子区域。更令人惊讶的是,该研究虽然只检测了人类基因组中一小部分的 RNA 结合蛋白(这项研究还重点阐释了 RNA 结合蛋白 RBM25 通过调控转录因子 YY1 与染色质的结合,进而调控染色质结构和转录激活与抑制的分子机制,全面展示了特异性的 RNA 结合蛋白介导的转录因子 YY1 的功能调控作用。整个发现提出了 RNA 结合蛋白作为转录因子或辅助因子调控转录的新概念,也开辟了 RNA 结合蛋白功能研究的新领域。Controlling Visually Guided Behavior
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