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- 泽叶生物
- 中国/美国
- 3505ZYP440Hu01
- 2025年07月13日
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-20℃
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6-12months
- 英文名：
Recombinant Deoxycytidine Kinase (DCK)
- 库存：
大量
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
50ug/100ug/1mg
上海泽叶生物科技有限公司是一家集研发、生产和销售于一体的生命科学实验室产品创新性高科技企业。主要从事免疫学，重组蛋白，细胞因子，抗原/多肽/蛋白等产品主要包括免疫调节蛋白、白细胞介素、CSFs、生长因子、干扰素、Chemokines 、Adipokines 、TGFß / BMP Proteins、神经因子、FGFs和TNF配体/受体防御因子等。并代理销售Amresco,qiagen Millipore,eBioscience,Sigma,SANTA,Sciencell,R&D、GBD、ATCC、HYCLONE, CELLutions Biosystems INC , Neuromics , Chemicon, Equitech-bio, Biovision, Promega, Kamiya, Prospec, Cytoskeleton, Novagen, SurModics, Cytelligen LONZA等二十多家国外知名品牌，致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务。
经甲醛固定的部分组织细胞，因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇，使免疫组化标记敏感性明显降低，因此在染色前，有些抗原需进行修复或暴露。
抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法，常用胰蛋白酶及胃蛋白酶，配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时，浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。
1、pH的应用范围及选择
抗原修复液的pH非常重要，有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要，同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强，但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效，而对固定很长时间旧的存档组织，酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。
2、抗原修复时应选择最佳温度
70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性，但经福尔马林固定的蛋白质，温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示，温度为92-98℃是合适的，95℃效果最好。
3、抗原修复液必须遵循自然降温规律，否则效果不好或达不到抗原修复的目的
抗原修复持续时间过后，取出放于室温中让其慢慢地降温，绝对不能为了争取时间，强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结，要有一个自然环境让其自然放松下来，随着温度的降低，它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。
4、尽量使用足量的抗原修复液
应用于抗原修复的液体，一定要充足，防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时，由于它的量较大，可延缓液体的沸腾时间，增加切片受微波辐射的量，对抗原修复将达到彻底。
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文献和实验X-100或脱氧胆酸钠）和低浓度变性剂（2mol/L尿素或盐酸胍等）洗涤除去脂类和膜蛋白，这一步很重要，否则会导致包涵体溶解和复性的过程中重组蛋白质的降解[6、7、8]。 包涵体的溶解必须用很强的变性剂，如8mol/L尿素、6~8mol/L盐酸胍，通过离子间的相互作用破坏包涵体蛋白间的氢键而增溶蛋白。其中尿素的增溶效果稍差，异氰盐酸胍最强；去污剂，如SDS[7]，可以破坏蛋白内的疏水键，可以增溶几乎所有的蛋白，但由于无法彻底去除而不允许用在制药行业中；酸，如70%甲酸[9]，可以破坏
杆菌的包涵体可采用离心收获。 洗涤 包涵体常用的洗涤试剂为中性去垢剂和还原剂。包涵体中主要由重组蛋白组成，同时也含有一些外膜蛋白（Omp C、Omp F、Omp A）、16S 和 23S、5S的r RNA、质粒 DNA 和其它杂质。去除这些杂质，可采用去垢剂 Triton X-100、脱氧胆酸盐和低浓度的变性剂等对包涵体充分洗涤。包涵体洗涤的洁净程度，对于后续的纯化步骤十分重要，包涵体纯度高，可以大大降低后续的纯化压力。但是，变性剂尿素的使用应该注意的是大肠杆菌外膜蛋白Omp T（37 kD
多糖和蛋白质的结合疫苗 由多糖抗原 与蛋白质偶联而成。多糖对人体无毒性、容易产生、结构稳定，广泛存在这细菌表面抗原结构中。该种疫苗具有能诱导婴幼儿产生保护性免疫应答的优点。因此在设计上首先选择能够产生较好保护性免疫反应的多糖抗原，载体蛋白应安全、可靠，通过还原胺化、酰胺缩合、硫醚缩合等方法进行多糖和载体蛋白的偶联。 目前，在细菌性结合疫苗中所使用的载体蛋白有：白喉毒素、霍乱毒素、重组蛋白D、膜蛋白质、外膜蛋白质、链球菌C外膜蛋白质以及与多糖抗原同源的细菌外源蛋白等。多糖成分有：脱氧
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