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- 库存:
99
- 细胞类型:
科研
- 物种来源:
鼠/人/其它
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 生长状态:
贴壁/悬浮
细胞常规说明:
培养条件:89%基础培养基+10%FBS+1%双抗
冻存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液
细胞质检情况:不含细菌、真菌、支原体等微生物污染
传代建议:1:2~1:3传代,2~3天换液1次
特别提醒:签收细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据,请务必重视。
悬浮细胞接收后的操作流程与注意事项
1.如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室
2.拧松瓶盖,细胞瓶竖立培养8h(或过夜)
3.待细胞沉底后吸除上层液体(含碎片残渣,请小心操作),然后吸取沉底的细胞层(2ML左右转移到新的培养瓶,加入新鲜的完全培养基(如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%)继续培养
悬浮细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1.将培养瓶/皿中的细胞重悬混匀
2.吸取2/3或者一半混匀后的细胞悬液到新的培养瓶/皿
3.分别在原瓶/皿和新分瓶的培养瓶/皿加入等量或者2倍的新鲜培养基,使细胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
4.注意培养基PH值变化情况和细胞密度,定期半量换液(每周2-3次),待细胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重复1项操作或者冻存
贴壁细胞接收后的操作流程与注意事项
1.收到细胞当天尽快更换新鲜完全培养基,第二天再进行消化处理
2.如果细胞收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养观察。同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基,培养观察
3.若出现生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养
贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1.吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加适量0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间)
2.镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml 完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4.注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项作或者冻存
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文献和实验细胞所需的时间就比夏天要长的多。SGC-7901胃癌细胞的消化传代大致步骤同上,但胰酶作用的时候应放在培养箱中,夏天0.1%的胰酶消化2分钟左右就够了,但冬天差不多要8分钟左右MDA-MB-231乳腺癌细胞消化传代基本同MKN-28,只是消化时间可稍长一点,1分钟左右。
本人养胃癌细胞sgc-7901已经半年多了,这半年来,可以说是及其不顺,同门的师哥师姐都说这个细胞很好养,增殖快,传代快,生命力旺盛,不容易感染,然,到我这里似乎就不像他们说的那样,问题接二连三的出现,但我从这一连串的失败中从一个懵懂无知者变成一个动作娴熟的能手,说句实在话还得感谢这批细胞给我带来的宝贵经验。首先我要说一点:无菌操作刚一接手细胞时,无菌相关事项早已耳熟能详,但我的第一批细胞在传第二代时不幸夭折,不明原因,总结一下还应该是操作的问题,被感染,虽没做细菌培养,但还应该是被感染致死
兰州大学第一医院李汛团队首次揭示胃癌演进中mRNA乙酰化修饰新机制
-acetylated COL5A1 研究论文。 图片来源:Springer Nature 官网 该项研究系统阐释了 NAT10 介导的 mRNA 乙酰化修饰促进胃癌细胞上皮 — 间质转化 (EMT) 和转移的机制作用,为通过靶向干预 NAT10 和 ac4C 通路抑制肿瘤演进提供新的策略。 这是国际上关于 mRNA 乙酰化修饰参与癌症进展的机制方面的首个研究成果。 图 1. 本文的科学示意图 研究中,团队成员首先发现 NAT10 在胃癌中表达广泛上调;NAT10 上调与患者预后不良及淋巴结转移密切相关。进一步
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