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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
默瑞生物
- 现货状态:
现货
- 规格:
压平宽度24mm,直径15mm,单位长度体积1.8 ml/cm
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文献和实验小于5ml,则每ml样品内加入30μl正辛酸,搅拌30min。 3. 10 000×g离心30min,取上清液通过定性滤纸过滤,装人透析袋,用20倍体积的PBS,4℃透析过液,中间换液3~4次。 4. 然后每毫升混合液加0.27g硫酸铵,搅拌30min。 5. 以5000g离心15min,收集沉淀物,溶于少量PBS中,再以15000×g离心20min。上清液即为提取的Ig,其中大部分为IgG,约占90%,少量为IgA及IgM,回收率>80%。整个操作可在24h内完成。
pH8.0PBS、1%硫柳汞、离心机及离心管、烧杯(25ml)搅拌器、无菌吸管,无菌吸管及毛细滴管、烧杯(500ml)透析袋等。(2)方法及步骤①抗体准备 用o~4~C的pH8。0磷酸盐缓冲盐水将球蛋白溶液稀释至浓度为30~40mg/ml,置入25ml烧杯内,放于冰槽中。②荧光色素准备 按每毫克免疫球蛋白加入荧光素0.01rug计算,称取所需的荧光素,用3%碳酸钠水溶液溶解。③将准备的抗体与荧光色素溶液等量混合,充分搅匀,在o~4~C冰箱中结合(最好在磁力搅拌机上持续搅拌)18~24h。④透析
-HCl缓冲液作为平衡液和洗脱液,流速每分钟1ml。第一个蛋白峰即为脱盐的抗体溶液。透析法是将透析袋于2% NaHCO3,1mmol/L EDTA溶液中煮10分钟,用蒸馏水清洗透析袋内外表面,再用蒸馏水煮透析袋10分钟,冷至室温即可使用(并可于0.2mol/L EDTA溶液中,4℃保存备用)。将盐析样品装入透析袋中,对50-100倍体积的PBS或Tris-HCl缓冲液透析(4℃)12-24小时,其间更换5次透析液,用萘氏试剂(碘化汞11.5g,碘化钾8g,加蒸馏水50ml,待溶解后,再加20% NaOH
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