名称:YT483型DNA寡核苷酸退火缓冲液(5X)优惠促销 规格:1ml 英文名:Annealing Buffer for DNA Oligos (5X) 编号:YT483 品牌:百奥莱博 产地:国产|进口 本品是一种经过我们多次实验证实、可以用于DNA oligo退火的缓冲液。该退火缓冲液不仅可以用于常规的DNA oligo的退火,而且特别适合于较难退火的用于RNAi(也称siRNA)质粒构建的DNA oligo的退火。用于RNAi质粒构建的DNA oligo通常由于含有约20个左右的互补序列,极易自身形成发夹结构,从而影响两条DNA oligo的正确退火。使用百奥莱博的Annealing Buffer for DNA Oligos(5X),可以有效避免DNA oligo自身形成发夹结构,并且两条oligo退火后可以直接和经酶切、纯化的质粒连接。通常转化后可以得到大量的阳性克隆。
使用本品操作非常简单,只需把待退火的DNA oligo和Annealing Buffer for DNA Oligos(5X)按照一定比例混合后,置于PCR仪上,约90分钟即可完成。如果一次退火反应体积为100微升,一个包装的退火缓冲液可以进行50次退火反应。
使用说明:
1. 把待退火的DNA oligo用经灭菌的MiliQ水或重蒸水配制成50μM。溶解Annealing Buffer for DNA Oligos (5X),混匀备用。
2. 如下设置退火反应体系: Nuclease-Free Water——>40µl Annealing Buffer for DNA Oligos (5X)——>20µl DNA oligo A (50µM)——>20µl DNA oligo B (50µM)——>20µl 按照上述顺序依次加入各种试剂,混匀。如果所用的PCR仪没有热盖,滴加矿物油(mineral oil)以防止蒸发。