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Tris Acetate-EDTA buffer
867
北京百奥莱博科技有限公司
500ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的TAE Buffer(50X)(TAE 缓冲液) 核酸电泳和回收用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多TAE Buffer(50X)(TAE 缓冲液)等核酸电泳和回收产品请联系我司咨询订购。
名称:TAE Buffer(50X)(TAE 缓冲液) 核酸电泳和回收
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:Tris Acetate-EDTA buffer
TAE即Tris乙酸盐EDTA缓冲液,是常用的DNA电泳缓冲液,常用于琼脂糖凝胶电泳,较少用于PAGE胶电泳。对于分辨率要求不高时,使用TAE和TBE均可;对于分辨率要求比较高时,较低浓度的胶有利于提高大分子量核酸的分辨率,此时宜使用TAE;而较高浓度的胶有利于提高小分子量核酸的分辨率,此时宜使用TBE。TAE(50X)是50倍浓缩的,使用时须根据具体的实验要求用蒸馏水或去离子水稀释50倍后使用。
1×TAE:40mM Tris-acetate, 1mM EDTA, pH8.0。
储存条件:室温。
欲了解更多TAE Buffer(50X)(TAE 缓冲液) 核酸电泳和回收的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·Klenow片段(无外切酶活性)
编号:YT510
英文名称:Klenow Fragment,Exo-
规格:100U
本酶是没有外切酶活性的Klenow片段,是大肠杆菌聚合酶I(E.coli.DNA polymerase I)的大片段(Large Fragment)缺失了外切酶活性的突变体。Klenow Fragment,Exo-保留了DNA聚合酶I的5"→3"聚合酶活性,但缺少完整的Klenow酶的5"→3"和3"→5"外切酶活性。
特点:由于Klenow Fragment,Exo-没有外切酶活性,其在末端补平时经常会在3"末端额外加上1个或多个核苷酸,因此不能用于产生平末端而用于后续的连接。
用途:5"突出末端的标记;随机引物法进行DNA标记;Sanger双脱氧法进行DNA测序等。
来源:由大肠杆菌表达,表达基因的来源为突变的 polA 基因片段。
分子量:约68kDa(单体)。
活性定义:37℃30分钟内,催化10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)摻入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
酶活性检测条件:67mM potassium phosphate(pH7.4),6.7mM MgCl2,1mM 2-mercaptoethanol,0.033mM dATP,0.033mM dTTP,0.4MBq/ml[3H]-dTTP,62.5μg/ml poly(dA-dT)·poly(dA-dT)。
纯度:不含DNA内切酶,不含RNase。
酶储存溶液:25mM Tris-HCl(pH7.5),0.1mM EDTA,1mM DTT,50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X):500mM Tris-HCl(pH8.0 at 25℃),50mM MgCl2, 10mM DTT。
失活或抑制:75℃加热10分钟或加入适量EDTA均可导致Klenow Fragment,Exo-失活。金属离子螯合剂,无机焦磷酸盐(PPi),大剂量的无机磷酸盐(Pi)均对Klenow Fragment,Exo-有抑制作用。
储存条件:-20℃。
使用说明:
1. 随机引物法进行DNA标记:
a. 参考如下表格设置反应体系:
DNA———————————————————————————————10µl(100ng)
Reaction Buffer (10X)——————————————————————5µl
125µM random decamer or hexamer primer——————————————10µl
补充无核酸酶的去离子水——————————————————————至40μl
混匀后沸水浴孵育5-10分钟,立即置于冰浴冷却。进行后续步骤前离心沉淀液
3 dNTP Mixture (0.25mM each , without the labeled—————————4μl
[α-32P]-dNTP, ~110 TBq/mmol (3000Ci/mmol)————————————1.85MBq (50μCi)
Klenow Fragment,Exo-———————————————————————1µl (5U)
补充无核酸酶的去离子水———————————————————————至50µl
b. 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
c. 对于random decamer primer,37℃孵育5分钟;对于random hexamer primer,37℃孵育10分钟。
d. 加入4μl 0.25mM dNTP,混匀后37℃孵育5分钟。
e. 加入1μl 0.5M EDTA,pH8.0终止反应。
f. 取1μl上述液体用于检测标记的效率。
g. 用Sephadex G-50或Bio-Gel P-60或其它适当试剂盒纯化标记好的探针。
2. 双链DNA 5’突出(5’ overhang)末端的标记:
a. 参考如下表格设置反应体系:
Digested DNA ——————————————————————————10~15µl(0.1~4μg)
Reaction Buffer (10X)——————————————————————2µl
[α-32P]-dNTP, ~15-30 TBq/mmol(400-800Ci/mmol) —————————0.74 MBq(20μCi)
或 [α-32P]-dNTP, ~110 TBq/mmol(3000Ci/mmol)———————————2.96 MBq(80μCi)
3 dNTP Mixture (2.5mM each , without the labeled)————————2μl
Klenow Fragment,Exo-———————————————————————0.2μl (1U)
补充无核酸酶的去离子水———————————————————————至20µl
b. 按上述体系配好之后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
c. 30℃孵育15分钟。
d. 75℃孵育10分钟终止反应。
3. 其他用途可以参考上述用途或适当的文献资料进行。
TAE Buffer(50X)(TAE 缓冲液) 核酸电泳和回收关键词:50X,YT421,TAE 缓冲液,TAE Buffer(50X)(TAE 缓冲液),Tris Acetate-EDTA buffer
·仲醇脱氢酶
编号:YT533
英文名称:Secondary Alcohol Dehydrogenase (Crude Enzyme)
规格:100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的仲醇脱氢酶,并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液,常用于NADH的再生。
CAS:9031-72-5
酶促反应:a secondary alcohol + NAD+ = a ketone + NADH + H+
储存条件:-20℃,有效期1个月。
注意事项:
1. 由于本产品需新鲜制备,在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活,所以收到酶液后请根据需要进行分装,并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长,酶活力会有一定程度的下降,收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生,融化后混匀即可,不影响正常使用。
·GRE荧光素酶报告基因质粒(糖皮质激素响应元件)
编号:YT448
英文名称:GRE-luc Reporter gene plasmid
规格:1μg
GRE报告基因质粒是用于检测糖皮质激素响应元件(glucocorticoid response element, GRE)转录激活水平的报告基因质粒。GRE质粒是以pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个GRE位点,可以高灵敏度地检测GRE的激活水平,检测糖皮质激素介导的信号途径(glucocorticoid-mediated signaling pathway)的激活水平。
pGL6质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
GRE质粒的主要信息如下:
Base pairs | 5615 |
Glucocorticoid response element (GRE) | 26-70 |
luc2 reporter gene | 116-1768 |
SV40 late poly(A) signal | 1803-2024 |
SV40 early enhancer/promoter | 2072-2490 |
Synthetic neomycin phosphotransferase | |
(Neor) coding region | 2515-3309 |
Synthetic poly(A) signal | 3334-3382 |
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region | 3449-3468 |
ColE1-derived plasmid replication origin | 3706 |
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region | 4497-5357 |
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site | 5462-5615 |
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region | 5564-5583 |
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