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文献和实验Elmer)a-32P dCTP, 6000 Ci/mmol (NEN Dupont)Formamide, 99% (Fluka)Bromophenol blue-Xylene cyanole (Sigma), reconstituted as directedGel Mix-6 sequencing gel solution (Life Technologies)Ammonium persulfate (Biorad)10X TBE buffer (0.89 M Tris Base, 0.89 M
DNA extraction from Mutation Detection Enhancement (MDE) Gel Stained with Silver Nitrate
reaction containing 10mM Tris-Hcl (pH 8.3), 50 mM KCl, 2 mM MgCl2 , 50µM dNTP, 0.5µM each primer, and 0.6 unit of Taq DNA polymerase (Cinagen, Tehran, IRAN). The primers used were 3-A (5'-TAGTCACTGGCAACAGTCTT-3') and 3-B (5'-AAAATCCCTGTTCCCACTCATAC¨C3
基因治疗--BIA Separations!让病毒纯化更高效
率。 首先要为整个过程中的核心——两步层析步骤,准备细菌培养液 1. 大肠杆菌收获、裂解-碱裂解: 这是快速高效纯化质粒 DNA 亚型的基础。 操作建议: 先收集菌体; 然后采用碱性裂解法制备原料; 再将细菌细胞(通常是细胞生物质或细胞沉淀)悬浮在 50 mMTris-HCl,10 mM EDTA,pH8.0 中; 通过加入等体积的 0.1-0.4M NaOH,1%SDS 进行裂解。 2. 裂解液浓缩: 氯化钙沉淀后澄清,除去了大量的主要样品
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