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文献和实验PCR Mhp3/Mhp4 (5.5 µM ) Inner PCR dNTPs 2 µM Inner PCR MgCl2 50 mM Inner PCR MasterAmp E 2X
TOP10 chemically competent cells
10 mM KOAc pH 7.0 (10 ml of a 1M stock/L) 80 mM CaCl2 .2H2 O (11.8 g/L) 20 mM MnCl2 .4H2 O (4.0 g/L) 10 mM MgCl2 .6H2 O (2.0 g/L) 10% glycerol (100 ml/L) adjust pH DOWN to 6.4 with 0.1N HCl if necessary
Assessment of Magnaporthe grisea mating type by spore PCR
or in a -80 C freezer for 10 min. For M. grisea , 10(4)-10(6) spores per reaction give the best result. Too many spores (over 10(6)) will inhibit the PCR reaction. PCR is carried out by adding to each tube of conidia 45 ml of 10 mM Tris-HCl (pH 9.0 at 25 C
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