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文献和实验Ficoll:一种已灭菌的,特定密度的密度梯度离心介质。被广泛用作从外周血、骨髓及脐带血中分离高活性的单个核细胞。 Ficoll-Paque溶液包含: Ficoll PM400:由高分子量蔗糖(Mr 400K)聚合物与表氯醇聚合合成(凝集红细胞) 泛影酸钠:使溶液在低粘度下具有高密度 EDTA二钠钙 Ficoll的保存:开盖前保存在4℃~30℃(避光),开盖后保存在 4℃~8℃(避光) Ficoll 产品细分如下: 使用Ficoll (1.077g/ml) 分离
的很稳定。消化时候请在37度温箱里,每5分钟稍微摇动一下。 注意:1)木瓜酶不要用巯基化合物激活,激活后消化好很多但是成活率坏很多;2)尽量用不含血清的培养液来配置木瓜酶而不是用hanks,使得神经元保持营养;3)木瓜酶一定要现用现配。 再次重申:除了消化过程中要37度,其余任何时刻都是要浸泡在0度(冰浴)的液体中。消化过后可以用1ml血清终止反应(我是用马血清,便宜,但是切忌不要用国产血清,污染几率很大)。把消化用的培养皿放在冰上冷却,然后垫高一面使得液体集中在另外一面便于吹打
concentrations. Tumor cells, K562 are used as targets. Tumor targets (1 x 106 cells/mL) are incubated with 100 ?Ci sodium chromate (The Radiochemical Centre, Amersham, GB)for 60 min at 37oC, washed and incubated for an additional 30 min to allow spontaneous 51Cr
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