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文献和实验μM calyculin A, 2 mM PMSF, and 10 μg/ml aprotinin). 4) Lyse for 20 min on ice and clarify lysates by centrifugation at 16,000 x g for 10 min at 4 oC 5) Preclear lysates with 30 μl of a 1:1 slurry of protein G-sepharose (Fast-Flow; Pharmacia
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