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ASSY,COIL,2ML/MIN,1000PSI,EG40

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      % Triton X-100的配制: 试剂:Triton X-100                                  28.2ml 0.1mol/L PBS(pH7.3)或0.05mol/l TBS(pH7.4)            72.8ml 配制方法:取Triton X-100及PBS(或TBS)混合,置37℃~40℃水浴中2~3h,使其充分溶解混匀。用前取该储备液稀释至所需浓度。 Triton X-100是一种非离子型表面活性剂(或称清洁剂),分子量为646.86(C34H

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      加三蒸水定容至500ml,使用前加PMSF至1%。 1.2 蛋白提取(此步在冰上进行) 组织称重,切碎,以每克组织加3ml RIPA裂解液,冰上以匀浆器匀浆,转到小离心管中,冰上放置40分钟,使其蛋白质充分裂解。4?C ,10000rpm,离心10min,取上清,转入小tube管中,-20 ℃贮存备用。 1.3 蛋白定量 Bradford 法定蛋白的原理:考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种

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