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文献和实验Procedure for Transfection of Mammalian Cells
in a CO2 incubator until the cells are 70-80% confluent. This will usually take 18-24 h. Prepare the following solutions in 12 x 75 mm sterile tubes: Solution A: For each transfection, dilute 2 μg DNA (plasmid) in 375 μl serum-free IMDM
相比线性范围更宽，灵敏度更高； CCK-8细胞活性检测试剂无需预制，即开即用。 四、实验操作指南 1．96孔板每孔加入细胞100 μL（留2个空白组不加细胞，加入同体积的培养基）。细胞置于37°C的5%CO2细胞培养箱中培养24 h。 注：A、通常细胞增殖实验每孔加入100 μL约含2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100 μL约含5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。 B、培养温度与细胞类型有关，一般哺乳动物细胞建议37°C
并混匀，注意避免气泡产生。 E、在加入Ac-特异性多肽-pNA混匀后，37℃孵育2~4 h。发现颜色变化较明显时即可测定OD405。如果颜色变化不明显可适当延长孵育时间，甚至可孵育过夜。 F、用酶标仪或分光光度计（100 μL比色皿）在λ=405 nm或400 nm测定样本吸光值。 G、通过计算OD样本值/OD阴性对照的倍数来确定凋亡诱导剂组Caspase 3的活化程度。 四、结果判断 Caspase的活性与AC-特异性多肽-pNA的分解量强弱成正比。 参考
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