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- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
free hemoglobin assay kit
- 库存:
679
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
50管/48样
测定原理:
血红蛋白分子中亚铁血红素具有类过氧化酶活性,催化H2O2释放新生态氧[O],[O]使酚以及4-AAP氧化生成红色物质,颜色深浅与Hb含量成正比。
试剂盒特点:
- 快速简便:全程约50分钟。
- 取样量微:本法取样本量150μL。
- 再现性好:变异系数CV=1.7%。
- 回收试验:X =102%。
- 受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
- 检测范围宽:3.6~200mg/L
试剂盒组成:
| 组分 | 规格 |
| 试剂一 | 80mL |
| 试剂二 | 80mL |
| 试剂三 | 50mL |
保存:2~8℃,有效期6个月
所需仪器及自备试剂:
- 可见分光光度计(比色测定波长为510nm)
- 恒温水浴箱或气浴箱(孵育温度为37℃)
- 漩涡混匀器
- 微量移液器
操作步骤:
- 显色剂配制:
按试剂一:试剂二:试剂三=20:20:1比例,现配现用,用多少配多少。 - 按下表加入各个成分
成分 测定管 空白管 血清(浆) 0.15mL ddH2O 0.15mL 显色剂 2.5mL 2.5mL - 混匀,37℃水浴20分钟,510nm,1cm光径,双蒸水调零测定各管OD值
- 计算公式:
游离血红蛋白(mg/L)=126.03×(测定OD值-空白OD值)+3.5041
注:根据标准曲线拟合计算公式计算
计算举例:
取正常人不溶血血浆150μL,测游离血红蛋白含量,按步骤操作,测得空白管OD值为0.008,测定管OD值为0.17。则计算结果为:
| 游离血红蛋白(mg/L) | =126.03×(测定OD-空白OD)+3.5041 |
| =126.03×(0.17-0.008)+3.5041 | |
| =23.921mg/L |
附录:标准曲线制作
- 测定标准品OD值
用FHb标准稀释液将血红蛋白标准品稀释成6个梯度的浓度:20mg/L、40mg/L、80mg/L、120mg/L、160mg/L、200mg/L,按步骤操作测定空白管及每个标准管的OD值 - 数据处理
标准浓度(mg/L) 测定OD 绝对OD 0 0.006 0 20 0.117 0.111 40 0.271 0.265 80 0.622 0.616 120 0.945 0.939 160 1.247 1.241 200 1.559 1.553 - 绘制标准曲线:

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文献和实验抗血清作为妊娠诊断试剂检定尿液中 hCG,只能用于 hCG 浓度较高的试验,否则妇女生理性排泄入尿液中的微量 LH 将与之发生交叉反应。因此在作为早孕诊断(敏感度应达到 50 mIu/ml hCG)的实验中必须应用只对 hCG 特异的抗 β-hCG,以避免与其它激素的交叉反应的发生。 4. 敏感性 在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为 mg/ml 水平,酶反应测定法的敏感度约为 5~10 μg/ml,免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿。标记的免疫测定的敏感
针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
),或者转化1 μmol的有关基团的酶量。 2) ELISA试剂盒检测原理 ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法(图A)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图B)等等。 抗体
1、如何增加外泌体试剂盒的提取效率? 答:首先,样品准备阶段确保样品的质量和数量充足;在提取阶段,加入 ECS 试剂后可以通过增加静置时间来提高提取效率,但同时也可能影响到纯度,因此静置时间也需要适当控制,初次实验可以考虑静置过夜。 2、离心后无法看到沉淀如何处理? 答:样品中的外泌体是微量的存在,离心后无法看到沉淀属于正常现象。建议离心后用 PBS重悬沉淀时不仅洗脱肉眼可见的沉淀部位,还要吹洗离心管外侧靠近底部的狭长区域,具体位置根据离心机倾斜角度决定。建议在下次样品准备阶段确保样品的质量
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