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文献和实验,硫酸钾铝饱和水溶液5ml,饱和氯化汞水溶液2ml,3%碱性复红乙醇(95%)溶液0.4ml,临用前混合,且需过滤后方可使用。染片时,媒染剂染色约6min,具体时间尚需在试验中摸索确定,染色液是抗酸染色Ziehl-Neelsen石碳酸复红染液,染片时需要1小片吸水纸盖在涂片上,染色3min。由于该方法媒染剂混合物不稳定、操作复杂、经验性强。Leifson于1930年建立了副品红法,并于1938年和1951年两次对该方法进行了改良,称为Leifson方法。染色试剂由3种溶液组成:A为1.5%NaCl
分别为0.3%双氧水和0.3%Triton X-100混合而成。配制方法是先用微波加热的36 ml PBS,再接着加120 ul Triton X-100,并加热一会儿,冷却至临用前加0.4 ml 30%H2O2。4、5%羊血清或封闭血清,用PBS稀释。5、含0.03%H2O2的0.05%DAB(避光):用20×DAB(1%,10 mg/ml)5 ul+0.1 ul 30% H2O2+95 ul PBS。6、一抗用PBS稀释(也可用抗体稀释液),二抗用中杉金桥的SP染色试剂盒。7、Xylene、梯度
免疫组化技术已经渗透到医学研究的各个领域,它在蛋白抗原的细胞准确定位上是其它蛋白检测方法无与伦比的。然而,要做好一张漂亮的染色切片,也不是十分容易的事。 我做免疫组化方面的实验多年,积累了很多经典案例。下面我把这些案例列举出来,并附上我们发现的问题以及如何解决这些问题的解决方法,以供大家实验参考和实验交流。 实验背景 以前做免疫组化,我一直用中杉金桥的 SP 三步法染色试剂盒,效果不错。在奥运会期间我准备做同批实验分不同批次酶免疫组化实验。第一批组化实验结果很好
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