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文献和实验等[82] 比较了传统苯酚–氯仿法、微柱吸 附法试剂盒和磁珠吸附法试剂盒对血浆游离结核分 枝杆菌DNA和质粒DNA的提取效率, 得出磁珠吸附 法对血浆游离DNA的提取效率最高, 尤其适合于小 片段DNA的提取。宋小燕等[83] 通过对国产试剂盒提 取血浆DNA的方法进行改良, 提取的血浆DNA的质 量不仅能达到相关分子 生物 学 实验的要求, 而且操 作简单、耗时短、成本低。Yin等[84] 将盐析与苯酚– 氯仿法相结合并进行改进提取血浆DNA, 得到的总 DNA是微柱吸附法 试剂
，硫酸钾铝饱和水溶液5ml，饱和氯化汞水溶液2ml，3%碱性复红乙醇（95%）溶液0.4ml，临用前混合，且需过滤后方可使用。染片时，媒染剂染色约6min，具体时间尚需在试验中摸索确定，染色液是抗酸染色Ziehl-Neelsen石碳酸复红染液，染片时需要1小片吸水纸盖在涂片上，染色3min。由于该方法媒染剂混合物不稳定、操作复杂、经验性强。Leifson于1930年建立了副品红法，并于1938年和1951年两次对该方法进行了改良，称为Leifson方法。染色试剂由3种溶液组成：A为1.5%NaCl
的是Lorch的Gomori法。本实验使用的是同时采用偶氮染色法和偶联反应法的TRAP/ALP染色试剂盒（和光纯药，产品编号294-67001）。关于切片的厚度，Lorch建议为8μm，同时也研究过普通的4μm切片是否能染色、双重染色的顺序应该先染TRAP和ALP中的哪一个、封片剂是否必须选水溶性封片剂等问题。染色法的结果是偶氮染色法中，切片过厚就会有酶扩散现象，即骨基质的TRAP染色倾向染成红色。即使是4μm的切片，只要增强了反应条件（反应温度及反应时间），也能充分染色。也就是说，TRAP染色反应
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