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文献和实验,可快速获得结果。三、齐~尼(Ziehl-Neelsen)抗酸染色法(操作) 【原理】结核杆菌对苯胺染料不易着色,若加温或延长染色时间使其着色后,再用3%盐酸酒精处理也不易脱色,再经美兰复染,结核杆菌及其他分枝杆菌仍呈红色,而非抗酸菌和细胞杂质等呈蓝色。【材料】1. 结核病人痰液:采取清晨第一口粘痰,或浓缩集落菌法处理过的痰标本。 2. 抗酸染色液 3. 载物玻片、玻片夹、酒精灯、腊笔等。【方法】1. 无菌手续采取痰液涂片,自然干燥,火焰固定。 2. 用腊笔将涂面局部隔开,滴加石炭酸复红
杆菌与结核杆菌相似,但较短粗。 螺旋体染色目前仍使用经典的Levaditi氏组织块银染法染色。石蜡切片染色则采用Wartrin Starry氏法。 大部分霉菌虽可在HE染色切片中显示出来,但有些则需特殊染色法。如用P.A.S显示白色念球菌,新型隐球菌用Crocott-Gomori氏六胺银法。 一、Gram氏染色法 操作方法: (1)切片常规脱蜡至水。 (2)结晶紫液中染45秒。
分别为0.3%双氧水和0.3%Triton X-100混合而成。配制方法是先用微波加热的36 ml PBS,再接着加120 ul Triton X-100,并加热一会儿,冷却至临用前加0.4 ml 30%H2O2。4、5%羊血清或封闭血清,用PBS稀释。5、含0.03%H2O2的0.05%DAB(避光):用20×DAB(1%,10 mg/ml)5 ul+0.1 ul 30% H2O2+95 ul PBS。6、一抗用PBS稀释(也可用抗体稀释液),二抗用中杉金桥的SP染色试剂盒。7、Xylene、梯度
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