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2-8℃
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一年
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大量
- 供应商:
贝博生物
- 规格:
50T/100 T
| 规格: | 50T | 产品价格: | ¥900.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100 T | 产品价格: | ¥1600.0 |
贝博® BBproExtra® 膜蛋白/胞质蛋白/核蛋白提取试剂盒适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织,如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织中分步提取膜蛋白/胞浆蛋白/核蛋白。提取过程简单方便,可在1小时内完成。 本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞膜组份,包括细胞质膜、核膜和各种细胞器膜。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。 本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。 本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。
2.将蛋白提取的时间缩短至1小时。
3.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
4.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
5.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
2.蛋白定量试剂盒
2.吸头
3.一次性手套
每400ul冷的蛋白提取液A/B/D中都分别加入2ul蛋白酶抑制剂混合物和2ul磷酸酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 取5-10×106个细胞,在4℃,800×g条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干。
3. 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每5×106个细胞中加入400ul冷的蛋白提取液A,混匀后,在4℃条件下用试剂盒所配针筒反复吸吹细胞,使细胞完全破裂。
5. 在4℃,1000×g条件下离心5分钟。
6. 将上清(I)吸入另一干净离心管,在沉淀中加入100-200μl冷的提取液B,高速涡旋振荡15秒,充分混匀。
7. 将混匀的提取液B置4℃低速振荡30-40分钟。
8. 在4℃,12000×g条件下离心10分钟。将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到核蛋白。
9. 在步骤6中所得到的上清(I)中加入8ul提取液C,充分混匀。
10. 在2-8℃振荡20-30分钟。
11. 在37℃水浴10分钟。
12. 在37℃下 1000×g离心3分钟,此时溶液分为两层,上层是胞浆蛋白部分,下层部分(II)是膜蛋白约为40-50μl。
13. 将上层小心吸入另一预冷的干净离心管,即可得到胞浆蛋白。
14. 用80-150μl冰冷的提取液D溶解步骤12中的下层部分(II),即得膜蛋白。
15. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
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文献和实验DNA Demethylation Upregulated Nrf2 Expression in Alzheimer’s Disease Cellular Model
Front Aging Neurosci 2015 (IF=4.348)
2.Guang Yu, Tonghai Yan, Ye Feng, et al.
Ser9 phosphorylation causes cytoplasmic detention of I2PP2A/SET in Alzheimer disease
Neurobiology of Aging 2013 (IF=6.189)
宝贝儿妮妮 请教各位大虾,我做的是AIF(凋亡诱导因子),激活后从胞浆释放到胞核,与DNA结合,引起DNA的片段化 那我是不是必须得提取核蛋白,来证实发生了核转位?要怎么来提取效果好一点?时间紧急啊,非常感谢 lily628 买抽提核蛋白的试剂盒,国内的或国外的都行. xhjggl 上海生工有 021-37772436 细胞核蛋白质提取试剂盒
细胞核蛋白质提取试剂盒 Nucleoprotein Protein Extraction Kit 产品说明:本试剂盒提供独特的组份,采用特殊的非离子型去污剂,以及焦磷酸钠等数种蛋白磷酸酶和蛋白酶抑制试剂,能够在非变性和低渗的条件下裂解细胞,经过洗涤去除大部分胞质蛋白和膜蛋白,释放的细胞核能够保持完整,再用Lysis Buffer对细胞核蛋白质进行抽提的同时可以保持核蛋白质的活性,因此该产品可合适用于SDS-PAGE电泳、Western Blot、免疫共沉淀,EMSA
充分判断分离效果,建议核、胞浆组分同时检测对应标志物。 分离效果验证 五、不同研究目的的方法选择 · 常规核蛋白检测、初步探索:可使用商业核质分离试剂盒,操作快捷; · 转录因子核转位、核受体研究:推荐采用经过验证的分步裂解方案,并结合核、胞浆标志物评价分离纯度; · 组蛋白、染色质结合蛋白研究:采用酸提取法或专门的染色质蛋白提取方案; · 亚核结构研究(核仁、核基质):需进一步采用梯度离心或专门的分级提取方案。 核质分离实验的核心在于“度”的把控——裂解程度、离心力度、洗涤
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