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细胞增殖毒性检测
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文献和实验标记10min。 离心洗涤两次后,用适量的完全培养液重悬细胞。CFSE的浓度国外报道从0.5uM~20uM都有,建议终浓度为2.5-5uM。浓度太低,细胞标记的荧光强度不够,太高了对细胞有毒性,且影响细胞增殖。标记孵育时要经常摇匀。
检测细胞增殖的方法很多,MTT、CCK8、BrdU 等等,你知道细胞可以 CFSE 染色用流式来检测细胞增殖么?好啦,不知道的同学搬好小板凳排排坐啦!CFSE 是一种荧光染料,脂溶性高,易进入细胞,可以与胞内氨基酸发生不可逆的结合,在细胞的分裂过程中能够进入子代细胞,同时荧光强度也变为母细胞的一半,可用流式或荧光显微镜对其进行分析。下面我们就开始动手,用流式来检测脾淋巴细胞的增殖。☟☟☟— 先准备一些试剂 —ConA 储存液:用双蒸水配置终浓度为 1 mg/ml(200×)CFSE 储存
还有就是用Invitrogen公司的CFSE细胞增殖流式检测试剂盒也可,我觉得。 qing0831 可以用流式细胞术检测,我经常做这方面的实验,可以交流一下,手机:15921609870 QQ:57325595 bigbang_0_0 cologenic assay bigbang_0_0 cologenic assay nmmxq Brdu incorporation assay
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