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- Biovision
- 美国
- K341-25
- 2025年11月23日
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- 文献和实验
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见产品包装
- 保质期：
一年
- 英文名：
HDAC2 Immunoprecipitation （IP） & Activity Assay Kit
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大量
- 供应商：
QIYBO
- 规格：
25次分析
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文献和实验测序分析 (NGS) 可用来在 ChIP 之后使用操作流程中所述的 ChIP 测序对免疫沉淀的 DNA 进行分析。ChIP 测序分析为用户提供蛋白质/DNA 相互作用的高分辨率基因组范围内的视图，这是实时 PCR 分析无法实现的。例如，在以下实验中，使用活性组蛋白标记物 H3K4me3、非活性组蛋白标记 H3K27me3 和 polycomb 家族转录因子 Ezh2（多结合在 H3K27me3 标记的基因区段）的抗体分别进行 IP。已知 Ezh2 与 HoxA 基因簇结合，但不与 GAPDH 基因结合，通过实时
IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“protein A/G"特异性地结合到抗体（免疫球蛋白）的FC片段的现象开发出来的方法。目前多用protein A/G预先结合在argarose beads上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，beads上的prorein A/G就能达到吸附抗原的目的。通过低速离心，可以从含有目的抗原的溶液中将目的抗原与其它抗原分离。 免疫沉淀实验的操作步骤比较多，同时由于在非变性条件下进行实验，所以要得到一个完美的实验结果，不仅需要高质
的方法。但是也存在一定局限性。酵母双杂交可以大规模的筛选未知的互作蛋白，但是假阳性高，免疫共沉淀及pull down只是对已知的蛋白互作关系进行验证，不能发现新的未知蛋白。 免疫沉淀-质谱联用IP-MS技术 随着蛋白质组学技术的发展，将免疫亲和与质谱技术结合产生的IP-MS技术则逐渐显示出他的优势。原理是以细胞内源性靶蛋白为诱饵，将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育，促进免疫复合物的形成；随后加入能够与抗体结合的protein-A/G（预先结合固化在琼脂小珠上），形成”结合蛋白-靶蛋白-靶
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