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- 2025年07月11日
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文献和实验只介绍单抗的纯化，这里只列出二者对小鼠亚型的亲和特性： 从上面讲的，综合考虑经济因素以及纯化效率，可以知道除IgG1需要用Protein G外，其它亚型的抗体一般都选择Protein A亲和纯化，IgM的纯化方法比较需要运气，如果不可以用Protein A进行亲和纯化，只好看稍后介绍的方法了。 言规正传，这里简单介绍一下用Protein A或者Protein G从腹水中纯化单抗的操作方法： （1）预处理。买来的Protein A或者Protein G
效应。假使在被测分子的不同位点上含有多个相同的决定簇，例如HBsAg的a决定簇，也可用针对此决定簇的同一单抗分别包被固相和制备酶结合物。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型，虽然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性，这也是用单抗作夹心法应注意的问题。双抗体夹心法测抗原的另一注意点是类风湿因子（RF）的干扰。RF是一种自身抗体，多为IgM型，能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗体夹心法检测的血清标本中如含有RF，它可充当抗原成份，同时与固相抗体和酶标
单克隆抗体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应，作一步检测。 在一步法测定中，当标本中受检抗原的含量很高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象，此时反应后显色的吸光值(位于抗原过剩带上)与标准曲线(位于抗体过剩带上)某一抗原浓度的吸光值相同(参见1.3.2，图1-4)，如按常法测读，所得结果将低于实际的含量
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