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文献和实验. At concentrations up to 100 ?M, PD98059 does not inhibit activation of MKK3 or SEK (MKK4) as determined by measuring phosphorylation at its activation site. U0126 is an inhibitor of both MEK1(IC50 of 72 nM) and MEK2(IC50 of 58 nM). U0126 is a highly
) a novel potent antitumour PI3K/Akt/mTOR inhibitor with a GI50 of Triciribine phosphate (NSC-280594):prevents the phosphorylation of Akt. A-674563: a potent selective protein kinase B/Akt inhibitor with an IC50 of 14 nM. A-674563 also shows
BCA工作液(BCA试剂A: BCA试剂B=50: 1),37℃条件下放置30min。④用酶标仪测定562nm波长处各孔的吸光度。最后根据标准曲线计算蛋白浓度。实验结果见后面结果部分内容。 (4)SDS-PAGE电泳: ①配胶:CaMK-Ⅱδ(1.5mm 10%分离胶, 5%浓缩胶)、A蛋白、B蛋白(1.5mm 5%分离胶,4%浓缩胶)、FKBP12.6(1.5mm 15%分离胶,5%浓缩胶)②上样:取制备好的蛋白样品,使用前沸水煮5min,12000rpm离心2min。各样本之间平衡后,每泳道
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