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- 2025年11月19日
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EpiSightTM Bisulfite Conversion Kit Ver.2
EpiSightTMBisulTaqTM DNA Polymerase,recombinant,Solution Ver.2
Enhanced Bisulfite Reaction抑制因NaHSO3反应的DNA分解，扩增长链长度。
通过添加Bisulfite溶液和反应促进剂（Enhancer），能抑制模板DNA的分解，能让胞嘧啶转化为尿嘧啶的效率大幅度上升。使用离心柱能使DNA纯化操作更加简便。
结合专用的Taq DNA Polymerase，即使是NaHSO3反应后，PCR扩增比较困难的碱基序列也能稳定且高效地扩增。
◆特点
● 离心柱操作简单
● Enhancer抑制DNA分解
● 有效扩增富含CpG的序列
● 热启动聚合酶防止非特异性扩增
有以下需求的可以考虑使用本产品
● 扩增长链进行高效分析
● 非甲基化胞嘧啶不转换为尿嘧啶的情况
● 甲基化胞嘧啶转换为尿嘧啶的情况
● 想提高PCR扩增效率
◆试剂盒内容（kit 内容）
EpiSightTM Bisulfite Conversion Kit Ver.2（20次）
| Bisulfite solution |
11.8ml×1 |
| Enhancer |
100µl×1 |
| 吸附缓冲液 |
10ml×1 |
| 洗涤液 |
4.8ml×1 |
| Desulfonation buffer（脱磺缓冲液） |
1ml×1 |
| 洗脱缓冲液 |
500µl×1 |
| 离心柱 |
20个 |
EpiSightTMBisulTaqTM DNA Polymerase,recombinant,Solution Ver.2（20次）
| BisulTaqTM DNA Polymerase,recombinant,Solution Ver.2 |
10µl×1 |
| 10×反应缓冲液 |
100µl×1 |
| dNTPs溶液（各 2mmol/l） |
100µl×1 |
◆使用例1
以小鼠ES细胞（胚胎干细胞）和M1细胞（白血病衍生细胞）的基因组DNA为模板，经过亚硫酸盐处理后，PCR扩增干细胞未分化标记FGF4启动子区。 PCR扩增的链长是521bp，CpG二核苷酸数为61位，对于NaHSO3 PCR扩增链较长，因为 GC含量高，被认为是对三维结构影响较大的区域。
ES细胞有干细胞未分化标记FGF4的mRNA表达，启动子区为非甲基化状态；M1细胞没有用于体细胞分化的Fgf4的mRNA表达，被认为启动子区处于甲基化状态。
● 样本：小鼠ES细胞和小鼠M1细胞的基因组DNA、
● PCR扩增链长：521bp（小鼠Fgf4启动子区）
● CpG：61位
● PCR扩增区域GenBank Accession No.
● AC_149593 : 230224–230744
结果
ES细胞和M1细胞的PCR扩增产物在克隆后，得到分析11个样本的碱基序列。小鼠ES细胞的Fgf4启动子区为非甲基化状态。小鼠M1细胞的Fgf4启动子区为甲基化状态。
◆使用例2
以Lambda DNA为模板，通过使用该试剂盒和DNA聚合酶在Bisulfite反应后，扩增910bp目的区域，分析碱基序列。Lambda DNA中所有的胞嘧啶都是非甲基化，Bisulfite反应后全部被转化为尿嘧啶，预测PCR扩增产物中不存在胞嘧啶。
● 样本：Lambda DNA
● 非甲基化胞嘧啶：150个
● PCR扩增链长：910pb
● PCR扩增区域GenBank Accession No NC_001416 : 26062–269
结果
下图所示，不存在胞嘧啶，150处的胞嘧啶全部转化为胸腺嘧啶。
以往的Bisulfite法中，DNA分解严重，条件设置困难，本产品能简单地成功实现900bp以上的PCR产物扩增。
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文献和实验Multiple Tissue Northern (MTN™)Blots
。 2.mRNA的变性胶电泳验证。以确保得到的是纯净、未受破坏的mRNA,并且保证Genomic DNA的含量小于1%。（尽管Total RNA可以用来mRNA代替制作MTN™膜，Clontech公司的膜仍然mRNA,使灵敏度提高约50倍，并大降低非特异选民性背景。实验重复性非常好，您可信赖。） 3.变性胶甲醛/1.2%琼脂糖电泳分离mRNA。（每个泳道含大约2μg的组织特异性mRNA,并且保证每个泳道可见β-action信号） 4.转于带正电的尼龙膜. 多重的实验信息 1.由于内参RNA分子
-time sequencing technology that overcomes these limitations. After bisulfite modification of genomic DNA, a region of interest is amplified by polymerase chain reaction (PCR) with one of the two primers being biotinylated. The PCR-generated template is rendered
代产品比，它有更加简单、快速、试剂全面的诸多优势，让您的操作更为方便 。 EZ ChIP™（catalog #:17-371）的特点与优势 更简单：过柱法的DNA纯化过程免去了phenol-chloroform提取的不方便性和不稳定性 更快速：新添的蛋白 酶抑制剂等试剂使盒中包括处理标本及实验操作的全部试剂，免去以前某些试剂需要临时准备的过程 更高更好的实验重复性：试剂盒中包括阳性、阴性对照抗体和相关PCR引物，帮助您评估整个实验
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