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- 保质期:
6-12months
- 英文名:
Recombinant Adenosine A1 Receptor (ADORA1)
- 库存:
大量
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
50ug/100ug/1mg
上海泽叶生物科技有限公司是一家集研发、生产和销售于一体的生命科学实验室产品创新性高科技企业。主要从事免疫学,重组蛋白,细胞因子,抗原/多肽/蛋白等产品主要包括免疫调节蛋白、白细胞介素、CSFs、生长因子、干扰素、Chemokines 、Adipokines 、TGFß / BMP Proteins、神经因子、FGFs和TNF配体/受体防御因子等。并代理销售Amresco,qiagen Millipore,eBioscience,Sigma,SANTA,Sciencell,R&D、GBD、ATCC、HYCLONE, CELLutions Biosystems INC , Neuromics , Chemicon, Equitech-bio, Biovision, Promega, Kamiya, Prospec, Cytoskeleton, Novagen, SurModics, Cytelligen LONZA等二十多家国外知名品牌,致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供一流的科研试剂和完善的技术服务。
经甲醛固定的部分组织细胞,因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇,使免疫组化标记敏感性明显降低,因此在染色前,有些抗原需进行修复或暴露。
抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和高压加热。在选用这三种方法时,浸泡切片的缓冲液的离子强度和pH、加热的温度和时间均影响着抗原修复效果。
1、pH的应用范围及选择
抗原修复液的pH非常重要,有效的抗原修复pH要比修复液的化学成分更重要,同样的修复液随着pH的升高染色的强度逐渐增强,但最佳pH范围为6.0-10.0。目前大家公认的最好的抗原修复液是pH6.0的柠檬酸盐缓冲液和pH8.0的EDTA缓冲液。作为通用修复液碱性pH的修复液要比酸性的有效,而对固定很长时间旧的存档组织,酸性pH的修复液则优于碱性的修复液。
2、抗原修复时应选择最佳温度
70-90℃的温度对未经固定的蛋白质可发生变性,但经福尔马林固定的蛋白质,温度必须达到92℃以上方能使其变性。研究结果显示,温度为92-98℃是合适的,95℃效果最好。
3、抗原修复液必须遵循自然降温规律,否则效果不好或达不到抗原修复的目的
抗原修复持续时间过后,取出放于室温中让其慢慢地降温,绝对不能为了争取时间,强行用冰块或冷水使其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其他的束缚或联结,要有一个自然环境让其自然放松下来,随着温度的降低,它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。
4、尽量使用足量的抗原修复液
应用于抗原修复的液体,一定要充足,防止切片干涸。应用大量的抗原修复液时,由于它的量较大,可延缓液体的沸腾时间,增加切片受微波辐射的量,对抗原修复将达到彻底。
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位点的序列,包括肽库和肽芯片 [5,6] 的多种技术可用来鉴定激酶底物。此外,一种 λ 噬菌体 cDNA 表达文库的固相磷酸化筛选 [ 7,8 」以及不同蛋白质相互作用筛选方法,如覆盖方法 [ 9,11] 和酵母双杂交系统 [ 12,14] 已被应用在这方面。最近,蛋白激酶被改造成可接受人工合成的腺苷三磷酸盐(环戊基 ATP ) 模拟物,并用于鉴定特异底物。初步的研究已经证明,通过激酶来研究磷酸化的蛋白质芯片是可行的 [ 18,19] 。为了确定磷酸化位点,抗磷酸化蛋白表位 [6] 的抗体将用于蛋白
领域奠基之作:Cell 重磅报道可胞外展示的糖基化修饰 RNA——glycoRNA
glycoRNA 可能是聚腺苷化(poly-A)的大 RNA。然而研究人员始终无法通过 poly-A 富集纯化 glycoRNA。于是研究人员利用长度依赖的 RNA 沉淀和结合硅胶柱,从小到大进行分离。有趣的是,glycoRNA 只与总 RNA 中一部分小 RNA 分离。 研究人员用蔗糖梯度和 SYBR Gold 染色分析标记的 RNA 分布,结果发现分离的是小 RNA/tRNA,18S rRNA 和 28S rRNA。 为了鉴定 glycoRNA 的转录本,研究人员利用蔗糖梯度从标记的 H9 和 HeLa
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