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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 供应商:
泽叶生物
- 检测范围:
0.156-10ng/mL
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
酶联免疫实验
- 适应物种:
Homo sapiens human
- 标记物:
详见说明书
- 样本:
血清、血浆及相关液体
- 规格:
48T/96T盒
上海泽叶生物试验以h.GDF-15为例,总结以下美国ImmunoClone检测试剂盒的技术质控的数据,
1.OD值:
正常保存条件下有效期内和超过有效期2个月所测OD值比较
正常有效期内OD值: 3.251,2.845,2.126, 1.859, 1.463, 1.022, 0.710, 0.08
超过2个月有效期OD值:3.1.7, 2.643, 2.125, 1.796, 1.453, 0.876, 0.432, 0.07
2.回收率:分别于定值血清及血浆中加入一定量的h.GDF-15标准品,重复测定并计算其品均值,回收率为测定值与理论值的比率。
3.线性:分别于定值血清及血浆中加入一定量的h.GDF-15标准品,并将标本按1:2,1:4,1:8稀释,线性范围即为稀释后样本中h.GDF-15含量的测定值与理论值的比率。
批内差:取同一批次试剂盒对低值,中值和高值样本进行定量检测,每份样本测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值和SD值。
批间差:选取 3 个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定, 每个样本使用同一试剂盒重复测定 8 次,分别计算不同浓度样本的平均值及 SD 值。(批内差: CV<10%;批间差: CV<11%)
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文献和实验1、标记:本试剂盒采用随机引物标记方法,可标记少至10ng,多至3μg的。能在新合成的链每20~25个核苷酸,掺入一个Dig-dUTP,反应时间约为1h。 2、杂交:按标准杂交方法进行。可以采用尼龙膜或硝酸纤维素膜。用过的杂交液可冻存于-20℃,重复使用。 3、免疫学检测:封阻后,检测反应的第一步,抗体结合物与标记结合,出现杂交的半抗原-标记,显色反应起始是在碱性pH条件下加入无色的显色剂X-磷酸盐和NBT,在几分钟内便开始出现蓝色,显色反应的过程持续3d。典型的例子是在24
注意:Label 溶液含有甲次砷酸盐和二氯化钴,严禁吸入和食入。 反应悬浮物收集于密闭、不易碎、有明确标识的容器中,按有毒废物处理。 试剂盒组成: 小瓶/盖子 1 蓝色 标签 酶溶液 内容物 大肠杆菌重组牛胸腺末端脱氧核苷酸转移 酶,在 storage buffer 中 10×conc. 5×50ul 在 reaction buffer 中的核苷酸混合物 1×conc. 5×550ul 抗荧光素抗体
含2.5Utaq酶而DNA合成量达1μg(3nmol脱氧核苷酸)时,开始变为底物过剩。延长延伸时间或添加Taq酶,可以克服之。但不实用,因每进行下一循环就要延长延伸时间一倍及多加一倍Taq酶,才能继续保持指数增长。 2.非特异性扩增产物的竞争 与上述情况密切相关,此时不需要的DNA片段与需要的片段同时竞争聚合酶,要克服这一情况是要提高反应特异性,使不需要片段不能大量积聚。 3.退火时产物的单链自己缔合 两条单链的DNA片段在退火时除了与引物缔合外,也可以自行缔合,这也会阻止
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