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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
大量
- 供应商:
泽叶生物
- 肿瘤类型:
见说明书
- 细胞类型:
细胞系
- 品系:
见说明书
- 相关疾病:
见说明书
- 物种来源:
鼠
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
贴壁;上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 器官来源:
鼠
- 运输方式:
干冰运输及发送复苏存活细胞
- 年限:
2年
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
株
含量:>1x106 个/mL
污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
含量:>1x106 个/mL
污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:角膜上皮细胞可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
如何去除原代培养中的成纤维细胞
培养细胞的纯化:1、自然纯化:即利用某一种类细胞的增殖优势,而排挤其他细胞生长,靠自然的增值潜力最后留下生长优势细胞,去除其他细胞。有些恶性肿瘤细胞可以通过此方法,自然纯化建立细胞系。
2、人工纯化(1)酶消化法:在消化培养细胞时,常是成纤维细胞先脱壁,而上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁,特别是在原代培养和培养早期这种差别尤为明显,因而可以利用这种差异采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开。
(2)机械划除法:角膜上皮细胞原代培养成功后,上皮细胞和成纤维细胞所数都同时出现,混杂生长。这种混杂生长常常分区成片,每种细胞都以小片或区域性分布的方式生长在瓶壁上。因此可以采用机械的方法去除不需要的细胞。
(3)反复贴壁法:成纤维细胞与上皮细胞相比,其贴壁过程快,大部分细胞常能在短时间内大约10-30min完成附着过程,而上皮细胞大部分在短时间内不能附着或附着不稳定,稍加振荡即浮起,这样可以利用此差别来纯化细胞。
(4)克隆法:采用细胞克隆法将细胞分成单个细胞,使之分别生长成克隆,选择出所需要的克隆。
(5)角膜上皮细胞培养及限定方法:某些细胞在生长过程中必须存在或必须去除某种物质,否则无法生长,可以利用这种技术来纯化细胞。
(6)流式分选。
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文献和实验睡眠不足为何会导致眼睛不适?厦大眼科团队揭示:缺乏睡眠会影响角膜上皮干细胞的增殖
Deprivation Induces Corneal Epithelial Progenitor Cell Over-Expansion through Disruption of Redox Homeostasis in the Tear Film,揭示睡眠不足对角膜上皮干细胞的危害。 图片来源:Stem Cell Reports 人们都说「眼睛是心灵的窗户」,而角膜则是眼睛的窗户。角膜表面的复层上皮细胞不断更新,维持角膜的高度透明和表面光滑,并防止外界微生物的入侵。人类角膜上皮细胞增生的源泉就是处于角膜
实验材料: 1. 正常人角膜移植供体角膜 2. 胰蛋白酶/EDTA液:0.05%胰蛋白酶,0.5mmol/L EDTA 3. KGM:无血清角质形成细胞培养液,添加0.15mmol/L 钙、0.1ng/ml 人上皮生长因子、5mg/ml 胰岛素、0.5mg/ml 氢化可的松和30mg/ml 牛垂体提取物;MEM;PBSA;胎牛血清 4. FNC:10mg/ml 纤连蛋白、35ug/ml 胶原蛋白和100mg/ml BSA(bovine serum albumin)。BSA
,0.1mm;实验方法:1. 清洗角膜3×5min;2. 剪除残留的巩膜,结膜和虹膜;3. 加入2ml中性蛋白酶Ⅱ,4℃过夜,轻微搅动;4. 将加入中性蛋白酶Ⅱ的角膜放入4℃摇床摇30min;5. 用DMEM/F12/GASP清洗角膜;6. 解剖显微镜下,小心去除角膜中央的上皮细胞(此时多数的中央上皮细胞已经剥脱)并除去角膜缘包含有Vogt栅栏区的色素上皮细胞;7. 用胰蛋白酶/EDTA消化角膜缘上皮细胞片37℃,10min;8. 加入等体积DMEM/F12/2FB/GASP;9. 400g离心10min
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