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大量
- 供应商:
泽叶生物
- 肿瘤类型:
见说明书
- 细胞类型:
细胞系
- 品系:
见说明书
- 相关疾病:
见说明书
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
贴壁;上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 器官来源:
人
- 运输方式:
干冰运输及发送复苏存活细胞
- 年限:
2年
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
株
含量:>1x106 个/mL
污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
含量:>1x106 个/mL
污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格:T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:脑动脉血管平滑肌细胞可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
如何去除原代培养中的成纤维细胞
培养细胞的纯化:1、自然纯化:即利用某一种类细胞的增殖优势,而排挤其他细胞生长,靠自然的增值潜力最后留下生长优势细胞,去除其他细胞。有些恶性肿瘤细胞可以通过此方法,自然纯化建立细胞系。
2、人工纯化(1)酶消化法:在消化培养细胞时,常是成纤维细胞先脱壁,而上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁,特别是在原代培养和培养早期这种差别尤为明显,因而可以利用这种差异采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开。
(2)机械划除法:脑动脉血管平滑肌细胞原代培养成功后,上皮细胞和成纤维细胞所数都同时出现,混杂生长。这种混杂生长常常分区成片,每种细胞都以小片或区域性分布的方式生长在瓶壁上。因此可以采用机械的方法去除不需要的细胞。
(3)反复贴壁法:成纤维细胞与上皮细胞相比,其贴壁过程快,大部分细胞常能在短时间内大约10-30min完成附着过程,而上皮细胞大部分在短时间内不能附着或附着不稳定,稍加振荡即浮起,这样可以利用此差别来纯化细胞。
(4)克隆法:采用细胞克隆法将细胞分成单个细胞,使之分别生长成克隆,选择出所需要的克隆。
(5)脑动脉血管平滑肌细胞培养及限定方法:某些细胞在生长过程中必须存在或必须去除某种物质,否则无法生长,可以利用这种技术来纯化细胞。
(6)流式分选。
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文献和实验最近第一次养细胞就养成功了,非常高兴,发上来跟大家分享 养细胞主要是 无菌 ,我用得是组织块消化法,首先要把培养用的DMEM和PBS 用过滤法抽吸式过滤一下,取材时注意无菌,150克的大鼠用7毫升的1%戊巴比妥消毒,用DMEM反复清洗,用眼科剪刮去外膜,剪开血管,用棉签刮去内膜的脂滴,再用眼科剪剪成碎块,铺到培养瓶里,均匀铺开,滴少许含20%FCS的DMEM湿润一下,然后再加3---5毫升的DMEM(含20%FCS)到培养瓶内,使铺组织块的一面向上,放到孵育箱里,约5个小时
Isolation of renal vascular trees and culture of the vascular smooth muscle cell 1. Male Wistar rats of about 250 g body wt were anesthetized with ether and were decapitated. 2. Kidneys and thoracic aorta were removed, rinsed
培养了快一个月的细胞了,今天终于鉴定出是我想要的血管平滑肌细胞。我养的是大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,采用的是组织贴块法培养。10天后传第一代(图1),16天后第二代(图2),22天后第三代(图3),并做a-actin免疫细胞化学鉴定(图4)。 图1图2图3 图4典型的血管平滑肌细胞生长"hill and valley"现象。
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