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120
- 供应商:
沪震生物
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
骨髓
- 相关疾病:
见说明书
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
悬浮;淋巴母细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
见说明书
- 器官来源:
骨髓
- 运输方式:
干冰运输or活细胞运输
- 年限:
1-52
- 生长状态:
悬浮;淋巴母细胞样
- 规格:
1000000细胞/株
组织来源:骨髓
培养条件:1640+10% FBS
形 态:悬浮;淋巴母细胞样
| 产品编号 | 名称 | 规格 | 价格 | 产品说明书 |
| HZ-H321 | HL-60;人原髓细胞白血病细胞 | 1×10^6 cells/瓶 | 询价 | 下载 |
HL-60细胞的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。我认为有以下几点需要注意:
(1)冻存前细胞状态,细胞最好在对数生长期,细胞密度适合,刚刚发生细胞融合,过密或连成片的细胞状态不好,而且消化时不容易分散;
(2)冻存的密度不宜过低,10的6次方-7次方的数量级比较好,我冻存的细胞一般T25培养瓶(5*107),一瓶冻一管(1.5ml冻存管),10cm培养皿(大概10的8次方个细胞)分成两管。
(3)HL-60细胞消化和吹打,切忌胰酶消化过度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培养基吹打哦,不是加入冻存液再吹打。
(4)离心后加入冻存液。冻存液中FBS的用量对于肿瘤细胞株而言要求不是很严格,我从10%-90%都用过,问题不大,个人认为10%-20%可以了,能节约处就节约点嘛!另外,冻存液可以在处理细胞前配置,放在4度冰箱预冷。细胞离心后直接用预冷的冻存液重悬,移入冻存管。
(5)关于“慢冻”,传统的方法,HL-60细胞冻存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更长,-80度过夜,最后液氮。对于条件较好的实验室和细胞冻存数量多的实验室,推荐使用程序降温盒,内装异丙醇,在-80度并内可以逐渐降温,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
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文献和实验法[1]测定阿糖胞苷(Ara-C)诱导的HL-60细胞凋亡,取得了满意的结果,现报道如下。 材料和方法 1 原理 吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者形态迥然相异,很易判别。在荧光显微镜下观察,可见四种细胞形态:活细胞(VN),核染色质着绿色并呈正常结构;早期
and fluorochromes staining. Chin J Physiol. 1998 Jun 30;41(2):121-6. 中华血液学杂志 1998年 第1期 No.1 JANUARY 1998 细胞凋亡与肿瘤的发生和治疗之间的关系是近年来国际上研究的热点,目前细胞凋亡的检测方法有DNA凝胶电泳法、电子显微镜法、染料透过法、TUNEL法和流式细胞仪法等。我们用染料透过检测法[1]测定阿糖胞苷(Ara-C)诱导的HL-60细胞凋亡,取得了满意的结果,现报道如下。 材料和方法 1.原理 吖啶
诱导HL-60细胞凋亡,并表现出典型的凋亡特征。本实验用1μg/ml HT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡,同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)对细胞进行双重染色,可以区别凋亡、坏死及正常细胞。细胞膜是一选择性的生物膜,一般的生物染料如PI等不能穿过质膜。当细胞坏死时,质膜不完整,PI就进入细胞内部,它可嵌入到DNA或RNA中,使坏死细胞着色,凋亡细胞和活细胞不着色。而一些活细胞染料由于为亲脂性物质,可跨膜进入活细胞,因而可进
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