- ¥1580 - 8890
- 美国ATCC
- 美国
- ZY-iCell -k004
- 2025年07月16日
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- 库存：
大量
- 供应商：
泽叶生物
- 肿瘤类型：
见说明书
- 细胞类型：
细胞系
- 品系：
见说明书
- 相关疾病：
见说明书
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
见说明书
- 细胞形态：
贴壁；上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
否
- 器官来源：
人
- 运输方式：
干冰运输及发送复苏存活细胞
- 年限：
2年
- 生长状态：
贴壁
- 规格：
株
含量：>1x106 个/mL
污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格：T75瓶或者1mL冻存管包装
含量：>1x106 个/mL
污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
规格：T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存：软骨细胞可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供科研使用。
如何去除原代培养中的成纤维细胞
培养细胞的纯化：1、自然纯化：即利用某一种类细胞的增殖优势，而排挤其他细胞生长，靠自然的增值潜力最后留下生长优势细胞，去除其他细胞。有些恶性肿瘤细胞可以通过此方法，自然纯化建立细胞系。
2、人工纯化（1）酶消化法：在消化培养细胞时，常是成纤维细胞先脱壁，而上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁，特别是在原代培养和培养早期这种差别尤为明显，因而可以利用这种差异采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开。
（2）机械划除法：软骨细胞原代培养成功后，上皮细胞和成纤维细胞所数都同时出现，混杂生长。这种混杂生长常常分区成片，每种细胞都以小片或区域性分布的方式生长在瓶壁上。因此可以采用机械的方法去除不需要的细胞。
（3）反复贴壁法：成纤维细胞与上皮细胞相比，其贴壁过程快，大部分细胞常能在短时间内大约10－30min完成附着过程，而上皮细胞大部分在短时间内不能附着或附着不稳定，稍加振荡即浮起，这样可以利用此差别来纯化细胞。
（4）克隆法：采用细胞克隆法将细胞分成单个细胞，使之分别生长成克隆，选择出所需要的克隆。
（5）软骨细胞培养及限定方法：某些细胞在生长过程中必须存在或必须去除某种物质，否则无法生长，可以利用这种技术来纯化细胞。
（6）流式分选。
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文献和实验试剂和材料： 1. 分化培养基：DMEM/F12（1：1）、1%ITS（胰岛素、转铁蛋白、硒；V/V）、TGF-β1 1ng/ml、HEPES 10mmol/L； 2. 胰蛋白酶/EDTA：胰蛋白酶（0.05%）和EDTA（0.53mmol/L）PBSA配制； 3. PBSA：无Ca2+,Mg2+的Dulbecco′s磷酸盐缓冲液； 4. 离心管，15ml； 5. 普通器皿，30ml，或圆锥底的离心管（50ml）； 实验方法： 1. 从培养瓶中吸出生长培养基弃之； 2.
软骨细胞的原代培养龄新西兰乳兔(雌雄不限，共18只，分6次处理),溺死，置于75％酒精溶液中10分钟，拿入超净工作台，自眼外眦至耳屏前剪开皮肤暴露皮下组织，再次严格消毒，自外眦外将颧弓由根部剪断，暴露髁状突，去净髁状突表面软组织及软骨膜，以眼科剪剪取髁状突表面的透明软骨，以磷酸缓冲液（PBS含青霉素、链霉素各100U/L）冲洗2遍，将软骨剪切成1－3mm3 左右碎块，0.25%胰蛋白酶先消化30-35分钟，PBS浸洗2遍；后置于50ml玻璃培养瓶，加0.1％Ⅱ型胶原酶(DMEM配制)，37消化
以兔软骨细胞为例： ①一般根据实验要求，选取不同年龄组的兔子，实际上兔子的年龄越小越好，毕竟幼体组织的活力要高于成体组织的活力，耳静脉空气注射法处死后,无菌条件下分离后肢关节软骨和肋软骨，剥离包裹软骨组织的筋膜和软骨膜，放入盛有PBS液的培养皿中。 ②将分离得到的软骨组织剁碎成0.3-0.5mm的组织块，移入25cm2培养瓶，用含双抗的PBS液冲洗软骨3次。 ③加入软骨体积10-15倍的0.25%胰蛋白酶，37℃消化１－２小时后终止消化。 ④加入0.02%II型胶原
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