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- 详细信息
- 用户评价
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4-8℃
- 保质期：
3年
- 英文名：
Berphadex G25 FF
- 库存：
大量
- 供应商：
北京博尔西科技有限公司
- 规格：
2ml*1支
提示：本店全部产品均为科研、实验专用试剂，非药品、非食品、非体外诊断试剂，不可用于动物及人体！
G25快速脱盐柱
（琼葡糖凝胶G25 FF脱盐柱）
1.产品介绍
G25快速脱盐柱（琼葡糖凝胶G25 FF脱盐柱）是将葡聚糖凝胶和琼脂糖凝胶混合制作，再经高度交联制备而成。具有稳定性好、刚性好流速快、重复性好、分辨率高，颗粒均匀，没有非特异吸附，装填后体积不收缩等优点，替代并超越传统的葡聚糖凝胶G25脱盐柱，G25离心型脱盐柱。
2.优势比较
| 比较项目 | 本公司： G25快速脱盐柱 |
G25离心型 脱盐柱 |
葡聚糖凝胶G25 脱盐柱 |
| 脱盐速度 | 快 | 快 | 慢 |
| 回收率 | 高 | 低 | 高 |
| 脱盐效果 | 优良 | 较差 | 优良 |
| 可否重复使用 | 可以多次重复使用 | 否 | 可以少次重复使用 |
| 稳定性 | 刚性好，不易形变，稳定性好 | 稳定性好 | 易形变，影响稳定性 |
| 操作要求 | 简便，无严格操作要求 | 对离心力，加液量等操作有严格要求 | 简便，无严格操作要求 |
3.用途
用于多肽，蛋白，糖类等，快速脱盐，缓冲液交换、纯化等。
4.规格
2ml *1支（填料体积为2ml/支、柱管总体积12ml）
5.产品性能
| 性能 | 指标 |
| 基质 | 高交联度葡聚糖凝胶和琼脂糖凝胶 |
| 粒径 | 90μm |
| *大流速 | 300cm/h(高流速) |
| pH稳定范围-工作/清洗 | 3-8/2-13 |
| 稳定性 | 耐受 8M脲、6M 盐酸胍、 70%乙醇、30%乙丙醇 |
| 储存缓冲液 | 20%乙醇 |
| 储存温度 | 4-8℃ |
6.操作方法：
（采用本公司G25快速脱盐柱可以在4-8 min左右完成一次脱盐纯化）
（1）将预装柱顶端塞子取下，打开下端堵头，将保存液流出或用吸管吸出，至距填料上界面2-3mm处，停止流液。
（2）平衡：用3-10倍柱体积的平衡缓冲液进行平衡
（3）上样：将保存液溜掉至距填料上界面2-3mm处时，开始上样，上样液体积控制在填料体积10-20%，最多不超过30%（即上样量200-600ul）
（4）洗脱：加入平衡缓冲液进行洗脱，洗脱体积应控制在 1 倍柱体积内（即1ml 内）
（5）柱子的清洗：用平衡液对柱子进行清洗，去除小分子
（6）保存：加入20%乙醇对柱子进行保存，待下次继续使用
7.使用建议
（1）上样前，样品需要充分溶解后离心或 0.45 um 滤膜过滤，防止堵塞层析柱。
（2）所有缓冲液需要脱气处理，避免柱床温度剧烈变化产生气泡。
（3）样品上样体积控制为 10%-20%倍柱体积，*高不超过 30%倍柱体积；样品体积越小，分辨率越高。
（4）洗脱体积应控制在 1 倍柱体积内，若有分离不彻底情况，调节上样量或样品浓度。
（5）为降低生物分子与介质的非特异性吸附，应降低结合液的离子浓度，如 0.025 M NaCl,若避免出现 NaCl，建议使用挥发性缓冲液，如0.1 M 乙酸铵或0.1 M 碳酸氢胺。
（6）填料再生的办法可以用 0.5M NaOH+2M NaCl 洗3个柱床体积，然后用水清洗到 pH为中性，再用 20%乙醇洗 3 个床体积即可。如果有脂类物质，也可以用 70%乙醇加一些非离子表面活性剂清洗 5 个柱床体积，对于变性蛋白可以用 6M 盐酸胍溶液清洗 5 个柱床体积。
8.注意事项：
1）凝胶从冷室或冰箱中取出后*好在室温下缓慢振摇恢复到室温，然后再装柱，以免产生气泡影响柱效。使用时保证柱子和缓冲液的温度一致，避免柱床内产生气泡，影响纯化效果。
2）本产品保存条件为20%乙醇，4-8℃。
凝胶过滤层析填料(预装柱)
| 型号 | 分离范围 |
| 琼葡糖凝胶G10 | <700 |
| 琼葡糖凝胶 G15(脱盐柱) | 100-1500 |
| 琼葡糖凝胶 G25 (脱盐柱) | 1000-5000 |
| 琼葡糖凝胶 G50 | 1000-30000 |
| 琼葡糖凝胶 G75 | 3000-80000 |
| 琼葡糖凝胶 G100 | 4000-120000 |
| 琼葡糖凝胶 G150 | 5000-300000 |
| 琼葡糖凝胶 G200 | 5000-600000 |
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文献和实验《Characterization of an aspartate aminotransferase encoded by YPO0623 with frequent nonsense mutations in Yersinia pestis》
《Regulatory Functions of PurR in Yersinia pestis: Orchestrating Diverse Biological Activities》
并洗脱到不同的组分中。 图8 凝胶过滤层析流程 （A）电子显微镜下的填料颗粒放大图。（B）样品中不同分子进入填料不同孔的示意图。（C) 分离过程的描述 (i）上样到层析柱；（ii）最小的分子（黄色）比最大的分子（深橘色）相比在层析柱上延迟更多；（iii）最大的分子最早被从层析柱上洗脱。样品在层析过程中被明显的稀释。（D）层析图谱示意图。 适用性 组群分离：可以从一组较大的分子中去除小分子，或者快速、简单地进行缓冲液置换， 上样体积一般小于30%CV（Column Volume，柱体
1. 去垢剂类型和特点表 常用的去垢剂大概有十几种，根据膜蛋白分子量可选用下面两根预装柱进行快速筛选： 表 2. 用两根预装柱快速筛选去垢剂结果表 运行流速设为 0.5 mL/min，15 min 以内就可以筛选一个去垢剂，而且上样量 5-50μL，可节省样品。 标签 摸索得到合适的去垢剂之后，就可以进行常规的层析实验。 增溶之后，高速离心取上清过亲和层析柱，为了减少后续的处理步骤，往往设计较小的标签，一般使用 HIS 或者 Strep，如果使用 GST 标签，则需要引入酶切位点。 标签
水洗脱就是降低盐浓度，洗脱浓度为0.X的硫酸铵，pHX 经过这一步后，GCSF的纯度可以接近90%，活力达到药典要求。 5.2 缓冲液置换 为了进行下一步离子交换，进行缓冲液置换。 用GE公司G25,不要吝惜填料，买一个500克包装，几千元，装一个脱盐柱，实验室里受用无穷。 缓冲液为醋酸缓冲液，50mM就行，pH=x.X 5.3 离子交换层析 这一步的主要目的是除去核算等低pH等电点物质，其次是浓缩。 上柱结束后，用0.xM的醋酸缓冲液洗涤，然后XXM醋酸缓冲
