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古朵生物
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100 μg @ 5 μg/μl
产品名称(单位)TypeOne™ Restriction Inhibitor 100 μg @ 5 μg/μl
Epicentre ,EPICENTRE 公司,Epicentre 试剂,Epicentre 代理—试剂专业供应商【上海古朵生物】
Epicentre生物技术公司是一家核酸样品制备试剂以及酶的供给商,Epicentre位于美国威斯康星州麦迪逊的Epicentre生物技术公司成立于1987年,是分子生物学产品的制造商和销售商,其产品广泛应用于RNA扩增及基因表达分析,基于转座子的遗传分析,核酸纯化,DNA序列分析,PCR及RT-PCR扩增,DNA及RNA修饰酶,基因组克隆,体外转录,以及蛋白质研究和纯化等领域。另外,公司拥有广泛的分子生物学产品生产线,可为客户提供蛋白质定制服务。
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文献和实验the following reagents in the order listed to a microcentrifuge tube: sterile ddH2O q.s (where "q.s." means quantity sufficient) 10X assay buffer one-tenth volume DNA x μl restriction enzyme* y μl (1-10 units per μg DNA ) Total volume z ul *If desired
Cloning via Restriction Digests
restriction enzymes for your insert and vector, and determine the appropriate reaction buffers. Combine the following in a microfuge tube (30 μL total volume): 2 μg DNA 1 μL Each Restriction Enzyme 3 μL 10x Buffer 3 μL 10
酶切反应(Setting Up a Restriction Endonuclease Reaction)
一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则,即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常,一个50μl的反应体系中,1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶,则可相应缩短反应时间;如果减少酶的用量,对许多酶来说,相应延长反应时间(不超过16小时)也可完全反应。二、 选择正确的酶不言而喻,选择的酶在底物DNA上必须至少有一个相应的识别位点。识别碱基数目少的酶比碱基数目多的酶更频繁地切割底物
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