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- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 库存:
512
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
1.2ug
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销售pGEM-T easy Vector (T载体)报价,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
pGEM-T easy Vector (T载体)报价
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:SJ0649
规格:1.2ug
关于pGEM-T easy Vector (T载体)报价的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·内毒素清除剂
编号:BL1187
规格:20ml/100ml
产品简介:
本公司生产的内毒素清除剂主要用于清除DNA、蛋白质或其他液体样品中的内毒素。在特定的pH值、盐浓度和温度条件下,内毒素清除剂能与DNA、重组蛋白以及液体样品中的内毒素特异性结合,经过室温高速离心后,DNA或蛋白质等保留在水相,而内毒素则被浓缩到极小体积的下层相而被清除。经过3次以上重复抽提后可将活性为5000~50000 EU/ml的内毒素水平降低到5~0.5 EU/ml以下,即降低1000~10000倍。本试剂4℃可储存半年,-20℃长期储存。
操作步骤:
提取前请将内毒素清除剂放在冰上冰浴5min,期间翻转瓶子数次使试剂均匀预冷。
1、a)已纯化的质粒DNA内毒素清除:吸取500μl DNA溶液于微型离心管,加入1/10体积3M NaAc pH5.2或1/20体积5M NaCl溶液,冰浴5min。
b)在提取质粒DNA过程中清除内毒素:以碱裂解法提取质粒为例,在加入裂解液和中和液并离心去除碎片之后,吸取含质粒DNA的上清于新离心管中,冰浴5min。
2、加入1/5体积预冷的内毒素清除剂,振荡混匀,溶液变浑浊。
3、冰浴5min,溶液应变清亮。
4、37℃水浴5min,不时振荡,溶液又变浑浊。
5、12000rpm室温离心5min,溶液应分为两相,上层水相含DNA,下层油状相含内毒素。
6、将含DNA的上层水相转移到新管,弃油状相,重复抽提三次,即重复步骤2-6三次。
7、加入2.5体积无水乙醇,-20℃沉淀30min或过了夜;12000rpm离心10min,弃上清;加入70%乙醇洗涤沉淀,12000rpm离心5min弃上清;空气干燥沉淀,加入100~200μl无内毒素的高纯水或TE溶解沉淀。
8、用内毒素检测试剂测定样品中内毒素活性,并与初始样品比较。
注意事项:
1、DNA浓度>1mg/ml时清除内毒素效率降低。由于DNA和蛋白质本身的性质,清除程序可导致10-20%DNA丢失,所幸的是与清除内毒素的艰难相比DNA更容易提取制备。
2、所有溶液应用无内毒素的高纯水配制,所有器械材料均应不含内毒素,玻璃器皿可高温烘烤,非挥发性水溶液可高压120℃高温处理。
内毒素简介:
内毒素(endotoxin)原称热原,是革兰氏阴性菌细胞壁外膜及其它微生物细胞壁的主要组成成分,其化学本质为脂多糖,主要由O-特异性链、核心多糖和类脂A三部分组成。脂多糖共价连接到非极性的疏水性类脂A(Lipid A)形成带负电荷的大分子,同时还具有一个亲水性的寡糖核,因而具有疏水和亲水双重性质。制备质粒DNA和重组蛋白时,细菌破壁之后将释放大量脂多糖。无论是普通制备纯化程序,还是离子交换、凝胶排阻过滤,甚至是氯化铯超速离心等高级制备程序,脂多糖任不可避免地与DNA或蛋白质牢固结合而被共同纯化。脂多糖具有强烈的免疫活性和细胞毒性,并能产生多种复杂的细胞生物学效应,大多数情况下会明显干扰并产生不可预测的实验结果。例如在DNA转染实验中,内毒素竞争性干扰转染试剂与DNA的结合,显著降低转染效率,并产生明显细胞毒性降低外源基因表达水平。
pGEM-T easy Vector (T载体)报价关键词:pGEM-T easy Vector ,SJ0649,T载体
pGEM-T easy Vector (T载体)由我公司长期专业供应,公司为广大顾客提供 pGEM-T easy Vector (T载体)产品说明,生产厂家,价格,规格,哪里买 。公司遵循高品质的产品,高质量的技术服务,合理的价格,是国内研发与生产,销售合为一体的一家大型企业,我们承诺:以最少的经费,最高的效率,得到您最需要的实验结果,同时我们承诺,若有质量问题,无条件退换。
·焦碳酸二乙酯
CAS:1609-47-8
英文名称:DEPC
规格:10ml
说明:DEPC是RNA酶的化学修饰剂,它和RNA酶的活性基团组氨
酸的咪唑环反应而抑制酶活性;蛋白质、组氨酸修饰剂;
DEPC与氨水溶液混合会产生致癌物,使用时需小心;
DEPC能与胺和巯基反应,因而含Tris和DTT的试剂不能用
DEPC处理。
别名:氧二甲酸二乙酯;Oxydiformic acid diethyl ester;
Dicarbonic acid diethyl ester
分子式:C6H10O5 分子量:162.14
CAS#:1609-47-8
外观:无色液体
特性:纯度:>97.5%
溶解性:溶于水,避光过了夜搅拌。
R:36/37/38-7 S:36/37/39-15
储存条件: 2-8℃ 避光保存
From Amresco E174
·4×SDS-PAGE分离胶缓冲液(PH=8.8)
编号:BL1378
CAS:1609-47-8
英文名称:DEPC
规格:100/500ml
说明:DEPC是RNA酶的化学修饰剂,它和RNA酶的活性基团组氨
酸的咪唑环反应而抑制酶活性;蛋白质、组氨酸修饰剂;
DEPC与氨水溶液混合会产生致癌物,使用时需小心;
DEPC能与胺和巯基反应,因而含Tris和DTT的试剂不能用
DEPC处理。
别名:氧二甲酸二乙酯;Oxydiformic acid diethyl ester;
Dicarbonic acid diethyl ester
分子式:C6H10O5 分子量:162.14
CAS#:1609-47-8
外观:无色液体
特性:纯度:>97.5%
溶解性:溶于水,避光过了夜搅拌。
R:36/37/38-7 S:36/37/39-15
储存条件: 2-8℃ 避光保存
From Amresco E174
pGEM-T easy Vector (T载体)报价关键词:pGEM-T easy Vector ,SJ0649,T载体
pGEM-T easy Vector (T载体)由我公司优惠供应,公司常年现货,欢迎广大科研工作者及经销商同仁前来咨询选购,另外公司专业从事进口科研生化试剂的批发及零售业务,产品涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物化学等诸多生命科研领域。因公司业务发展的需要,现诚征各地经销代理商,欢迎有志从事本行业的精英、同行莅临指导。
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文献和实验Making the T-vector: 1.Digest 5 ug of vector DNA ( pBluescript & pUC18) with a restriction enzyme that generates a unique blunt end site, for example EcoRV or Sma I ( we prefere EcorV for it's stable activity at 37 C) for 2 hours at 37 C. 2.Run
Also see DNA Cloning § Making TA Vector (Crawford Lab) T-vectors are linear-blunt-ended plasmids with a few dT's added on by Taq polymerase. § Making TA Vector (Mounir Izallalen) § Direct PCR
enzyme. This hasn't given good results, though; I think Klenow in particular is somewhat thermostable). Phosphatasing to prevent vector reclosures: After the restriction digest, add 1 µl Biolabs calf intestine alkaline phosphatase. Incubate 37℃
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










