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文献和实验:常规东西(枪头,酒精灯,打火机等),3套取材器械,400目不锈钢网筛,5ml培养瓶(进口),2ml刻度吸管 一共做了2次,原代细胞提取。第一次灭菌操作不到位。第二次汲取教训,器械仪器经清洗--烤干--报纸包好--高压--烤干处理,超净台用酒精擦拭,紫外灯照30分钟-1小时。操作时戴口罩手套。但结果不好,老是污染。图片见附件。说明一下,之前的胰酶,DMEM/F12和gibco胎牛血清在其他地方(一般实验台)打开取用过1次。 1.请大家帮忙看看
式移液管操作,以防止在吸取样品时有气溶胶遗留。5)大体积样品应该用单独包装的无菌一次性移液管吸取。6)管子打开前都要简短离心以减少气溶胶的产生,而且管子不能用力崩开,这样会产生气溶胶。7)任何时候都应该穿实验服和带手套,手套要经常更换,尤其在抽提过程中每一步之间都要更换。实验服要专门用于样品准备间,经常清洗。2、样品准备和RNA-PCRRNA-PCR的额外步骤需要额外的样品操作,这样增加了样品之间污染的机会。为了避免这一问题,反转录一步可以在样品准备区进行。在RNA-PCR中应用UNG以防
的条件下只可暂时失活,但限制因素去除后又迅速恢复活性。常规高温高压灭菌方法和蛋白抑制剂不能使所有的Rnase 完全失活。 1.它广泛存在于人的皮肤上,因此制备 RNA 时必须戴手套。 2.RNase 的又一污染源是取液器。根据取液器制造商的要求对取液器进行处理。一般情况下采用以 DEPC 配制的 70% 乙醇擦洗取液器的内部和外部,可基本达到要求。 3. 塑料制品、玻璃和金属物品的处理 (1)塑料制品:尽量使用一次性无菌塑料制品。已标明 RNase-free 的塑料制品,如没有开封使用过,通常
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