
质谱分析实验技术服务
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- 2025年07月15日
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- 服务名称:
质谱分析实验技术服务
- 提供商:
北京瑞金特生物
- 规格:
个
简介:
瑞金特生物实验中心引进美国安捷伦公司的液相色谱质谱联用仪。形成了高通量、高灵敏度和高分辨率的规模化蛋白质分析支撑技术体系,为促进蛋白质组学及相关研究的发展,共享先进的技术资源,近年来生物质谱实验室蛋白质/多肽质谱鉴定、生物工程药物结构确证和蛋白质组学多项成熟的分析技术已为国内外客户提供了广泛的服务。
设备仪器:
美国安捷伦公司Agilent (xct-6330) 型号的液相色谱仪,MS为美国热电公司的TSQ型号质谱仪;质谱仪采用ESI(电喷雾电离)离子源,MS/MS 串连四极杆分析器。可在线检测极性有机化合物、核酸、多肽、小分子蛋白质及其化学修饰产品的实际分子量,并对送检样品进行分子量鉴定,纯度及修饰效果分析。
质量范围M/Z 10~2,000 分辨率R=2M
设备应用:
芯片/质谱 (HPLC-Chip/MS) ——显著提高了纳流液-质联用分析结果的灵敏度,可靠性和分析速度 安捷伦推出了世界第一台的基于微流控技术的纳流液相色谱芯片-质谱平台。 这项技术将主要用于蛋白质组学和药物分析方面。其核心是采用可重复使用的聚合物液相色谱芯片取代传统的液相色谱柱。这个平台将多维色谱集成在一块芯片上,采用插拔式设计,操作简单与标准液相色谱/质谱联用仪相比, 它的其灵敏度提高了3,500倍。尽管芯片的体积很小,但是可以容纳最长20 厘米的有C18填料的色谱柱。液相色谱/芯片作为一个模块与安捷伦的所有6000系列液-质联用仪完全兼容。 液相色谱-芯片技术主要应用蛋白质组学研究和药物标靶研究等领域。有关 的应用发表在许多国际知名的杂志上,如Analytical Chemistry; Electrophoresis, PNS上液相色谱芯片产品主要包括七种类型的芯片涵盖大分子和小分子的应用:
* 酶解蛋白质鉴定芯片 #1 * 酶解蛋白质鉴定芯片#2 * 寡聚糖的芯片 * 直接进样芯片
* 小分子芯片 * 质谱校正和诊断芯片 * 全蛋白质分析芯片
测试范围:
多肽、蛋白质的电喷雾质谱分子量测定以及天然产物分子、生物大分子、有机分子的质谱测试和研究
送检样品要求:
样品应尽量不含盐份、离子表面活性剂、去垢剂及一些难挥发性盐。样品送检量、溶解方式以及未知可否做质谱检测的样品可与我们的工作人员联系以便提高检测效率。
(送样单请附带检测样品的品名及精确计算分子量)
送样须知:
A:样品量:50pmol干粉或1ug/uL以上(一般测试)、100pmol干粉或1ug/uL以上(MALDI串联质谱分析)、100ug干粉以上(二硫键分析、糖基化分析,磷酸化分析,其他修饰分析)、10ug干粉以上(SDS-PAGE或IEF);
B:盐含量:挥发性无机盐,<20mM,请勿使用PBS、SDS和尿素等质谱干扰物质;
C:考马斯亮蓝染色样品可全部接收,银染过程中不得使用戊二醛作为固定剂;
D:请告知样品是否有修饰,并请注明修饰方式。
主要应用 :
* 蛋白质组学研究 * 寡聚糖和糖蛋白的研究 * 小分子化合物分析
* 药物发现和研发 * 食品和环境样品分析
检测报告:
从收到样品起1-2个工作日内可给出样品的检测报告,以电子邮件的形式发给您并附带检测结果分析。包括结果有:
一级质谱:质谱图、肽段分子量、数据库检索结果; 二级质谱:质谱图、肽段分子量、数据库检索结果、肽段氨基酸序列、修饰位点等;
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文献和实验上,然后被转化为光电信号记录成质谱图。根据质谱图的位置可进行定性和结构分析,而根据峰的强度可进行定量分析。 质谱分析法的特点与应用范围是: ( 1 )主要用以确定分子量。广泛用于有机物的分析,也可作为结构分析之用,因此是很好的定性分析的工具。 ( 2 )灵敏度高。目前用于有机物分析的质谱仪的灵敏度可达到 100pg 数量级。 ( 3 )操作简单,分析时间短,准确度高。 ( 4 )与色谱仪联用,对混合物试样可以同时进行分离
实验步骤 1. 胶内酶切随机选择重复性好,差异显著,无明显变形、拖尾,与周围蛋白点分离明确的蛋白点作为质谱分析对象,进行胶内酶解。 1) 从胶上切取蛋白质凝胶颗粒置入96孔培养板内,用去离子水清洗数次。 2) 加50 ul脱色液[30 mmol/L potassium ferricyanide和100 mmol/L sodium thiosulfate 1:1]在室温下震荡至凝胶中棕黄色褪尽,弃去溶液
Proteomics Primer 1. Proteomics 2. 2-D PAGE 3. Immobilised pH gradients (IPGs) 4. Mass spectrometry 5. Principles of mass spectrometry 6. Matrix assisted laser desorption/ionisation (MALDI) 7. Electrospray ionisation
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