蛋白组学技术服务

简介：瑞金特生物技术平台可承接单项的蛋白质组学技术服务, 同时平台也开展规模化、高通量的蛋白质组学委托科研服务。服务项目包括样本制备、iTRAQ/SILAC/DIGE/蛋白双向电泳/蛋白N端测序/蛋白表达，免疫组化、蓝色温和胶电泳系统分离蛋白质复合体、图像分析、胶内酶切、蛋白质鉴定、数据库查询与结果分析、免疫印迹及磷酸化蛋白质检测。

样品制备技术

1．适于双向电泳的蛋白质提取及定量。

2．亚细胞器提取及纯度评价（质膜、线粒体、内质网、细胞核、胞浆）。

3．常规HE染色、特殊染色，有10余种特染检查，如网状纤维染色、Mas on染色、弹力纤维、胶原纤维染色等。

4．免疫组织化学检查：有80余种免疫组化检查项目，淋巴瘤系列标记抗体、激素受体、细胞增殖性标记物、癌基因蛋白等。

5．Beckman公司Optima™ L-80 XP超速离心机。

6．Beckman公司Avanti™ J-25高速离心机。

7．德国产徕卡全自动脱水机（ASP200）、包埋机（EG1150）、石蜡切片机（RM2255）。

电泳及电转系统

1. BIO-RAD公司PROTEAN IEF Cell等电聚焦仪。

2. BIO-RAD公司PROTEAN II xi Cell电泳槽。
3．BIO-RAD公司Mini-PROTEAN 3 Electrophoresis Module/Mini Trans-Blot Module。
4．Amersham pharmcia Biotech公司IPGphor等电聚焦仪。
5．Amersham pharmcia Biotech公司Ettan DALT II System。
6．Amersham pharmcia Biotech公司Hoefet miniVE electrophoresis and electrotransfer Unit。

7.图像分析软件BIO-RAD公司PDQuest™ 2-D analysis software version:7.11。
8.图像分析软件Amersham pharmcia Biotech公司Image Master™ 2D version:5.0。
9．自动切胶酶解系统为BIO-RAD公司Spot Cutter；WATERS公司MassPrep。

10．Amersham pharmcia Biotech公司Spot Handling Workstation。

11．Amersham pharmcia Biotech公司SE250垂直电泳系统和梯度混合仪。蛋白质组学中的核心质谱技术

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱MALDI-TOF-MS（WATERS公司）：可测定生物大分子的分子量高达600KDa。通过肽质量指纹谱（PMF）和肽序列标签（PST）技术可高灵敏度、高通量、快速鉴定蛋白质，是蛋白质组学研究必不可少的生物质谱，也是临床蛋白质组学首选的技术。还可分析寡核苷酸序列、多糖结构、聚合物分子量分布、特殊合成化学品等。

1、MALDI-TOF/TOF质谱仪（ABI公司）： 能从一个样品的PMF图谱中直接选择肽段离子进行片断化和MS/MS分析，而且分析可在数秒或数十秒内完成。该仪器是目前进行高灵敏度、高通量的蛋白质组分析非常理想的仪器。
2、 电喷雾四极杆飞行时间串联质谱仪ESI-Q-TOF-MS（WATERS公司）:自动化的LC-MS/MS肽段测序功能，是多肽组学研究的重要技术。样品用量少，仅fmol样品就可测序（如电泳胶）。

3、离子阱串联质谱仪ESI-Ion Trap-MS （Thermo公司）：中心具有两台离子肼串联质谱仪（LCQ； LTQ各一台），高通量LC-MS/MS肽段测序功能，为SHOTGUN技术首选串联质谱。

中心最新引进的Finnigan LTQ-FT线性离子阱回旋共振质谱仪，是目前国际上蛋白质鉴定准确性最高的仪器之一，主要特点1.超高分辨率；2.精确质量数和多级串连质谱分析数据，现已投入使用。

服务流程：
1、 讨论分析实验方案
2、 确定服务内容
3、 签订服务合同
4、 进行实验，定期向客户反馈
5、 整理实验报告
6、 完成合同内容
7、 后续实验服务，进一步合作