手机验证
2~8℃
长期
345
北京百奥莱博科技有限公司
20次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的鸭瘟PCR诊断试剂盒优惠经过十多年市场考验,质量过硬,灵敏可靠,为您的免疫实验提供信得过的单克隆抗体
鸭瘟PCR诊断试剂盒优惠
品牌:百奥莱博
编号:DL102
规格:20次
产地:国产|进口
【注意】 用前请认真阅读注意事项。
【用途】 用于鸭瘟的检测、诊断和流行病学调查。
【试剂】
编号 数量 保存
SR-I 4mL 室温
SR-II 10mL 室温
SR-III 24mL 室温
TU-1 500μl 室温
TU-2 60μl -20℃
TU-3 1.4mL -20℃
TU-4 250μl -20℃
TU-5 20μl -20℃
TU-6 20μl -20℃
TU-7 25μl -20℃
TU-8 60μl -20℃
T 400μl -20℃
【操作步骤】
1. 病料处理
取适量肝、脑、脾、法氏囊等病料组织,于灭菌研钵充分研磨,用PBS液按照1:3稀释成均匀乳剂,-20℃反复冻融3次以上。
2. DNA的提取
(1) 取已冻融好的病料,1000rpm离心5min,取上清200μl(或质控样品T,200μl),加25μl TU-1和3μl TU-2,50℃水浴1~2h,期间轻柔振荡几次帮助裂解。
(2)加入200μl SR-I,剧烈颠倒轻摇充分混匀,70℃放置10min。
(3)冷却后加入100μl异丙醇,充分混匀后,加入一个吸附柱(试剂盒内提供)中(吸附柱放入收集管中)10000rpm离心30秒,弃掉收集管中的废液。
(4)加入500μl SR-Ⅱ,10000rpm离心30秒,弃废液。
(5)加入700μl SR-Ⅲ,10000rpm离心30秒,弃废液。
(6)再加入500μl SR-Ⅲ,10000rpm离心30秒,弃废液。
(7)将吸附柱放回空收集管,13000rpm离心2min。
(8)取出吸附柱,放入一个干净的离心管中,在吸附膜的中间部位加入70μl TU-3(使用前事先预热至65-70℃,有助于提高洗脱效果),室温放置3~5min,12000rpm离心1min,将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,室温放置2min,12000rpm离心1min。
(9)洗脱液即为模板,可放在2~8℃,如果要长时间存放,可以放置在-20℃。
3.PCR操作
加样体系:(将下列试剂加入0.5mLPCR反应管中,最好在冰浴条件下加样。
TU-4 12.5μl
TU-5 1.0μl
TU-6 1.0μl
模板 10.5μl
反应条件:
94℃预变性
94℃变性 4min
40s
53℃退火 40s 共35个循环
72℃延伸 40s
72℃延伸 6min
4℃终止 5min
4.电泳:
配制1%琼脂糖凝胶,取PCR产物5uL混合1μl TU-7,加样于凝胶孔中,同时在相邻孔加3μl TU-8,在120v 电压下,1×TAE液中电泳15分钟,在紫外成像仪下观察结果。
【结果判定】
在380bp 位置出现扩增带,实验结果为阳性。
【注意事项】
1. 每次使用,开盖之前请先瞬时离心,使试剂沉于管底。
2. 本试剂盒为20头份量试剂,操作失误或移液器不准确造成最终剂量不够情况,不予负责。
3. 所有试剂在要求温度下保存,-20℃保存试剂尽量减少反复冻融,使用后的试剂立即放回,避免在室温搁置太久。
4. 尽量建立PCR试验操作区,避免交叉污染。
5. 加样和反应程序严格按照说明书进行,由于操作失误、移液器不精确、定时不准确造成无结果情况,不予负责。
6. 吸头、离心管和PCR管在使用前,要高压灭菌,操作过程尽量不要用手接触到管内壁,可用镊子夹取。
7. 注意防止试剂污染,在有效期限前用完。
【有效期】
本制品有效期为1年,生产日期见包装内侧。
欲了解更多鸭瘟PCR诊断试剂盒优惠的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
ARB12470 大鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)含量检测 Rat cholest erolester transfer protein,cetp ELISA KIT
BL1431 1×TBST
13755-38-9 硝普钠 Sodium Nitroprusside
CYB164024 羊抗牛IgG(1:500~1000)-HRP
HC0023 96孔PCR板(半裙边)
ARB12849 小鼠内源性糖皮质激素(GC)血清中含量检测
6025-81-6 Trans-Zeatin 反玉米素
PY01-081 水解乳蛋白(进口原料) 250克
003002 狗血浆 100ml|500ml
F030109 HRP标记羊抗乙肝e抗原抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-HBeAg
NF-215 羊抗人Tf血清
ARB12260 大鼠肌红蛋白(MYO/MB)elisa检测操作说明书 Rat myoglobin,myo/mb ELISA KIT
L-缬氨酸 o-Vanillin 72-18-4
ARB10943 人伴侣蛋白10(CPN10)免费代测 Human chaperonin 10,cpn10 ELISA KIT
硅烷偶联剂KH560 D-(+)-Raffinose pentahydrate 2530-83-8
PY08-031 一次性硫乙醇酸盐培养基 10ml 10支/盒,用于产气荚膜羧菌的培养,也可用于药品、生物制品无菌检验
F030303 胶体金标记小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg*GOLD
DN3601 尿液基因组DNA快速提取试剂盒
SJ0769 麦芽侵粉
盐酸环胞苷 2-Deoxy-L-ribose 10212-25-6
F030818 BIOTIN标记兔抗猪IgG抗体 Rabbit Anti-Pig IgG*BIOTIN
鸭瘟PCR诊断试剂盒优惠关键词:鸭瘟PCR诊断试剂盒,DL102,百奥莱博
·猪瘟病毒抗体胶体金检测试纸条
编号:DL025
规格:20T/盒
·猪O型口蹄疫病毒IgG抗体PPA-ELISA检测试剂盒
编号:DL055
规格:96T×2
【产品简介】口蹄疫(FMD)又称口疮热,是由口蹄疫病毒引起的主要侵害偶蹄动物的急性、热性、高度接触性传染病。在口蹄疫的免疫预防工作中,接种了口蹄疫疫苗后,由于多种因素可能导致猪不产生或产生低水平口蹄疫病毒抗体。
VP1蛋白是FMD的主要结构性蛋白,构成FMD病毒颗粒的主要结构,是FMD的主要保护性抗原。本试剂盒采用ELISA方法检测猪血清中的特异性口蹄疫(O型)IgG抗体,适用于猪场口蹄疫病毒疫苗免疫状况的评价以及感染猪的血清学诊断。
【产品内容】
试剂盒主要成分 数 量
包被板 96T×2
阳性对照 1ml×1
阴性对照 1ml×1
酶标结合物 20ml×1
样品稀释液 20ml×2
底物液 20ml×1
终止液 20ml×1
20×浓缩洗涤液 25ml×1
封口胶 2份
使用说明书 1份
【成分性状】
包被板 96孔塑制微孔板,无色透明,干燥,无杂质吸附
酶标结合物 略带黄色澄明液体
阴、阳性对照 略带黄色澄明液体
样品稀释液 略带黄色澄明液体
浓缩洗涤液 无色或略带黄色澄明液体
底物液 无色或微蓝色澄明液体
终止液 无色澄明液体,低温条件下可能会出现絮状沉淀
【用法与判定】 按以下步骤进行:
1、需要自备的器材
1.1 微量移液器;
1.2 微量移液器配套使用的枪头;
1.3 用来稀释洗涤液的500 ml量筒;
1.4 适用于检测96T微孔板的酶标仪;
1.5 用于稀释样品的1.5 ml Ep管;
1.6 蒸馏水或去离子水。
2、样品的制备
用样品稀释液将待检血清样品进行100倍稀释(建议:2μl血清样品加入198μl样品稀释液中),样品加入包被板前要充分混匀,稀释不同待检样品注意更换枪头。注意:①制备血清用的血液样本应无溶血现象发生;②不能稀释阴性、阳性对照。
3、操作步骤 (﹡使用前应轻轻旋转或震荡予以混匀,所有试剂应平衡至室温)
3.1 在A1和A2孔中分别加入100μl阴性对照;
3.2 在A3和A4孔中分别加入100μl阳性对照;
3.3 取100μl经1:100稀释好的待检样品加入相应孔中,并做好记录;
3.4 37℃孵育30min;
3.5 将各孔的液体弃入废液桶,每孔加250μl的洗涤液(试剂盒内20×浓缩洗涤液需用蒸馏水或去离子水稀释后方可使用。如有结晶,需先溶解后,方可进行稀释)进行洗板,重复5次,每次30s;
﹡加液时防止各孔间洗涤液串流影响检测结果,尽量将孔内洗涤液抛甩干净;
3.6 每孔加100μl酶标结合物;
3.7 37℃孵育30min;重复步骤3.5;
3.8 每孔加100μl底物液;
3.9 37℃孵育10min(避光显色);
3.10 每孔加100μl的终止液;
3.11 立刻于450nm波长处测定各孔的吸光度值,即OD450值。
4、试验有效性判断
4.1阴性对照:正常情况下,阴性对照孔OD450值≤0.2;
4.2阳性对照:正常情况下,阳性对照孔OD450值≥0.4;
4.3临界值(C.O.)计算:临界值=0.18+阴性对照均值;阴性对照OD450值大于0.2时应舍弃,如所有阴性对照OD450值均大于0.2时须重复实验;阴性对照低于0.05时以0.05计算。
4.4结果判定: 检测样品OD450值≥临界值,判定该检测样品为阳性; 检测样品OD450值<临界值,判定该检测样品为阴性。
【注意事项】
(1)待检血清样品数量过多时,应先使用血清稀释板将所有待检血清稀释完毕后,再统一将血清样品加入酶标板中,使反应时间一致。
(2)试剂盒使用的过程中不要吸烟、喝水和吃东西。
(3)底物液和终止液对皮肤有刺激性,注意防护。
(4)底物液不要暴露于强光和任何氧化剂;使用洁净的玻璃和朔料容器处理底物液。
(5)所有试剂应在2~8℃存放;使用前恢复到室温,使用后放回2~8℃。
(6)注意防止试剂盒组分受到污染。
(7)不要使用超过有效期的试剂,不同批次试剂盒的组分不要混用。
(8)操作过程中的移液、时间和洗涤必须精确。
【规格与包装】96T×2
【贮藏与有效期】2~8℃避光保存,有效期为6个月
鸭瘟PCR诊断试剂盒优惠关键词:鸭瘟PCR诊断试剂盒,DL102,百奥莱博
·抗展青霉素单克隆抗体
编号:DL133
英文名称:Monoclonal Antibodies Against PAT
规格:100μL
·猪蓝耳病(变异毒)一步法RT-PCR诊断试剂盒
编号:DL092
英文名称:Monoclonal Antibodies Against PAT
规格:20次
【注意】 接到货后请认真阅读注意事项。
【用途】 用于猪蓝耳病的检测、诊断和流行病学调查。
【试剂】
编号 数量 保存
SR-I 8mL 4℃
SR-II 14mL 4℃
TU-1 250uL -20℃
TU-2 20uL -20℃
TU-3 20uL -20℃
TU-4 20uL -20℃
TU-5 500uL -20℃
TU-6 60uL -20℃
TU-7 25uL 4℃
TU-8 30uL 4℃
【操作步骤】
1.RNA提取
(1) 取疑似猪蓝耳病的病料(肺脏、淋巴结、脾脏、肾脏等)1~4g于无菌研钵,研磨并用Hanks液或PBS稀释成1:4乳剂,分装1.5ml灭菌EP管,反复冻融2~3次,8000r/min离心5分钟。(血清可直接进行检测,无需冻融)。
(2)取200uL上清液,移入新的1.5mL灭菌EP管中,加入400uLSR-I,反复颠倒几次混匀,室温放置5~10分钟。
(3)加入200uL氯*(代"仿"),漩涡振荡15秒混匀。室温下放置2~3分钟。
(4) 12000r/min离心10分钟,取上层水相(注意:切勿吸取到里两相之间的杂质),转移到一个新的EP管中,再加入等体积异丙醇混匀,室温放置10分钟。
(5)12000r/min离心10分钟,弃去上清,加入SR-II 700uL,充分洗涤沉淀RNA后,12000r/min离心5分钟,小心吸去上清(注意:严格防止RNA丢失)。
(6)用洁净吸水纸吸干管壁的SR-II,室温放置2~3分钟。用20uLTU-5溶解,即为模板,即用或-70℃冻存备用。
2.One-Step RT- PCR加样体系
4.电泳
称量0.25g琼脂糖,放入锥形瓶,加入25mL 1×TAE液(可配置50×浓缩液,储存备用),于微波炉中熔解,加入1.5uL的TU-8混匀。封闭好电泳槽,加入梳子,倒入琼脂凝胶,待凝固后,将PCR产物5uL混合1uL TU-7,加样于凝胶孔中,同时在相邻孔加3uLTU-6,在120v 电压下,1×TAE液中电泳15分钟,在紫外成像仪下观察结果。
【结果判定】
如果为蓝耳病毒感染阳性,会有两种电泳结果,一种为目的
片段低于500 bp(约470bp),为蓝耳病毒变异株感染(Nsp2
基因缺失);另一种结果为出现大于500bp片段(约为560bp),
为Nsp2基因未发生缺失的猪蓝耳病毒感染。
1.DL2000 Marker
2.标准阳性片段
【注意事项】
1.每次使用,开盖之前请先瞬时离心,使试剂沉于管底。
2.本试剂盒为20头份量诊断试剂,操作失误或移液器不准确造成最终剂量不够情况,不予负责。
3.所有试剂在要求温度下保存,-20℃保存试剂尽量减少反复冻融,使用后的试剂立即放回,避免在室温搁置太久。
4.尽量建立PCR试验操作区,避免交叉污染,RNA抽提严格防止RNA酶污染,要求戴一次性塑料手套,并经常更换。
5.加样和反应程序严格按照说明书进行,由于操作失误、移液器不精确、定时不准确造成无结果情况,不予负责。
6. 枪头、离心管和PCR管在使用前,最好用DEPC水(0.1%)处理,然后高压灭菌后烘干,操作过程尽量不要用手接触,可用镊子夹取。
7.注意防止试剂污染,在有效期限前用完。
8. TU-8所装试剂为致癌物质,避免接触到皮肤。如若不甚接触,请立即用洗涤剂清洗。
【有效期】
本制品有效期为1年,生产日期见包装侧面。
我公司强烈推荐动物疫病PCR检测试剂盒系列产品,热情期待您的咨询选购鸭瘟PCR诊断试剂盒优惠。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。