pfu DNA聚合酶 核酸扩增(PCR)

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北京百奥莱博专业生产销售pfu DNA聚合酶 核酸扩增(PCR)，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

品牌：百奥莱博
规格：100U|5×100U
编号：RFT101
产地：国产|进口
高保真平末端DNA聚合酶
● 贮存
-20℃保存一年。
● 产品简介
pfu DNA Polymerase是嗜热古细菌来源的DNA聚合酶，该酶除具有5’-3’DNA聚合酶活性外，还具有很强的3’-5’外切酶活性，增强了PCR扩增的保真度。与Taq酶相比，pfu聚合酶热稳定性更好，更能忍耐较高的变性温度。Pfu的保真性是Taq DNA聚合酶的10-15倍。延伸速度为0.5kb/分钟。PCR产物3’端不带碱基A，为平滑末端，要通过平滑末端克隆法进行克隆。
● 产品组成（RTH3102-02）
pfu DNA Polymerase（2.5U/μl） 40μl
10×pfu PCR buffer（含Mg2＋） 1ml
● 活性定义
1单位(U) pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
● 酶贮存缓冲液
50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol
● 适用范围
高保真的DNA*(代"片")段的扩增、DNA*(代"片")段的平滑化。
● 使用说明：1. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：成分 20μl反应体系 50μl反应体系 终浓度
Template 0.04-0.2 μg 0.1-0.5 μg as you wish
Primer 1（10 μM） 0.4 μl 1 μl 0.2 μM
Primer 2（10μM） 0.4 μl 1 μl 0.2 μM
10×pfu PCR buffer(含Mg2+) 2 μl 5 μl 1×
dNTP Mixture(10 mM) 0.4 μl 1 μl 200 μM each
pfu (2.5 U/μl) 0.4 μl 1 μl 0.05U/μl
ddH2O up to 20 μl up to 50 μl -
注1：如果需要改变Mg2+浓度，根据下表调节
PCR反应体系中Mg2+终浓度 2 mM 2.5 mM 3 mM 4 mM
20μl反应体系中25 mM MgSO4加入量 0 μl 0.4 μl 0.8 μl 1.6 μl
50μl反应体系中25 mM MgSO4加入量 0 μl 1 μl 2 μl 4 μl
注2：配制反应液时，请最后加入pfu，因为本酶有很强的3’-5’外切酶活性，有可能降解引物。
2. 混匀后，离心快甩将反应液收集到管底。
3. PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
4. PCR仪上执行以下程序：步骤 温度 时间 循环数
初始变性 94℃ 3-5 min 1
变性 94℃ 30 sec 25-40*
退火 50-60℃* 30 sec
延伸 72℃ 0.5kb/min*
最后延伸 72℃ 5 min 1
*注： PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件（温度、时间等）。
● 注意事项
1. pfu 酶具有 3’-5’的外切酶活性，所以 pfu 酶扩增时延伸速度远比 Taq 酶低，应根据扩增产物的长度设置相应的延伸时间，一般情况下 pfu 酶的延伸速度为每分钟 0.5kb；同时 pfu 酶的 3’-5’的外切酶活性可能降解引物，所以应最后把pfu 酶到反应体系中，并立即进行 PCR 反应。
2. pfu 酶的热稳定性比 Taq 酶好，对于 GC 含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃，对 pfu 酶的活性无影响。
我公司的pfu DNA聚合酶 核酸扩增(PCR)，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销售下列产品：

·双色预染宽分子量蛋白Marker（10-170KD）
编号：RFT052
规格：20次
● 储存条件：-20℃保存，开封后有效期12个月
● 产品简介：
本产品包含10种纯化的预染蛋白质组成，分子量范围为10kD-170kD，其中70kD条带为红色，10kD条带为绿色，其余条带为蓝色，可以用于SDS-PAGE和Western Blot转膜时确定未知蛋白的分子量。
● 使用说明：a 第一次收到该产品，室温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底，根据需要适量分装成小管，-20℃贮存，每次取一小管使用。
b-20℃取一管样品，彻底融化，上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来，0.75mm×5mm（厚度×宽度）的加样孔上样5μl，其他规格梳子请适当调整上样量。
c 电泳结束后，可以直接在胶上观察结果。
d 预染蛋白Marker在不同的凝胶系统中迁移率会有不同，因此只能用来粗略估计目的蛋白的大小。如要精确确定蛋白的大小，请在同一凝胶系统中用非预染蛋白Marker来标定预染蛋白Marker的分子量。


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BFD015 鸡新城疫抗体检测试剂盒
ARB10461 人生长激素释放因子(GH-RF)含量测试 Human growth hormone relasing factor,gh-rf ELISA KIT
鸟苷-3",5"-环磷酸钠盐 Ethyl gallate 40732-48-7
ARB12941 小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)定量分析 Mouse platelet-derived growth factor soluble receptor α,pdgfsr-α ELISA KIT
ARB11533 人高分子量细胞角蛋白(CK-HMW)酶联免疫定量检测 Human cytokeRatin high molecular weight,ck-hmw ELISA KIT
ARB11549 人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)Elisa分析 Human apoptosis signal regulating kinase 1,ask-1 ELISA KIT
1239-45-8 溴化乙锭 Ethidium Brmide
7647-14-5 Sodium Chloride 氯化钠
PY04-062 两性霉素B及头孢霉素混合液 1ml/支×10支 每支添加于100mlCamp-BAP琼脂培养基基础中，用于弯曲杆菌选择性分离培养
BTN120401 热启动Taq DNA聚合酶 Hot Start Taq DNA Polymerase
BTN130896 YPG液体培养基 YPG Liquid Medium
3-硝基苯甲酸 Acetyl CoA 121-92-6
L-谷氨酰胺 Indigo carmine 56-85-9
5-核黄素磷酸钠盐二水物 L-Tyrosine disodium salt 6184-17-4
PY01-086 心浸粉(牛) 250克|1公斤
58-63-9 Inosine,Free Base肌苷
ARB14096 小鼠D-乳酸(D-LA)含量测试
BL0977 狗外周血淋巴细胞分离液
对羟基苯丙酮 o-Cresolphthalein 70-70-2
PY08-076 磷酸盐缓冲液 9ml 20支/盒 用作稀释液
十三烷酸 MISIN 638-53-9
ARB10577 人成熟促进因子(MPF)尿液中含量检测 Human matuRation promoting factor,mpf ELISA KIT
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·Taq plus DNA聚合酶
编号：RFT103
规格：500U|5×500U
高效率、高保真DNA聚合酶
● 贮存
-20℃保存一年。
● 产品简介
Taq plus DNA Polymerase是由pfu DNA Polymerase和Taq DNA聚合酶按照一定的比例混合而成，具有扩增效率高，错配率低的特点。与Taq DNA聚合酶相比，Taq plus DNA聚合酶具有扩增长度长，保真性好的优点；与pfu DNA聚合酶相比，具有扩增速度快，反应效率高的优点。此酶具有比Taq DNA聚合酶约3倍的PCR可信度。该酶的大多数PCR产物3’端带碱基A，可以通过TA克隆法进行克隆。
● 产品组成（RTS3102-02）
Taq plus DNA Polymerase（5U/μl） 100μl
10×Taq plus PCR buffer（含Mg2＋） 1ml
● 活性定义
1单位(U) Taq plus DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
● 酶贮存缓冲液
50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol
● 适用范围
适用于要求保真性和高效率的PCR反应，大多数情况下可以替代Taq DNA 聚合酶。
● 使用说明：1. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：成分 体积 终浓度
Template 0.1-1μg as you wish
Primer 1（10 μM） 1μl 200nM
Primer 2（10 μM） 1μl 200nM
10×Taq plus PCR buffer 5μl 1×
dNTP Mixture(10 mM) 1μl 200μM each
Taq plus(5 U/μl) 0.5-1μl 2.5-5U
ddH2O up to 50μl -
2. 混匀后，离心快甩将反应液收集到管底。
3. PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
4. PCR仪上执行以下程序：三步法：步骤 温度 时间 循环数
初始变性 94℃ 1-5 min 1
变性 94℃ 30 sec 25-40*
退火 Tm-5℃* 30 sec
延伸 72℃ 1 min/kb
最后延伸 72℃ 5 min 1
*注： PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件（温度、时间等）。

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